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主题：【已应助】分析电泳不出峰原因

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小冬1106
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发表于：2015/05/06 22:47:05 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
各位，麻烦帮忙分析一下电泳不出峰的原因。毛细管正常活化，有时候一根毛细管进标品会出峰（标品浓度满足出峰浓度），电流变化正常（在出峰后稍变大且平稳）；但是有时候活化好几根毛细管都是进标品都不出峰，电流一直很平稳，活化步骤是一样的。最近这种情况很频繁，活化过的毛细管不出峰的要比出峰的多，快被虐疯了，希望各位给点意见，看看问题出在哪里？
该帖子作者被版主 nini2006加 5积分， 2经验，加分理由：发帖
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2015/5/6 23:06:19 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
用的什么仪器？光是你测的物质不出峰还是不论进什么样（如电渗流标记物等）都没任何响应？
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小冬1106
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2015/5/6 23:13:14 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 nini2006(nini2006) 发表:
用的什么仪器？光是你测的物质不出峰还是不论进什么样（如电渗流标记物等）都没任何响应？
用的是安捷伦7100，不论什么都不出峰，五一两天活化了估计有4根毛细管，电流正常，什么都不出峰，然后停了两天，昨天上午活化新毛细管，可以了，接着做了一天，今早上用昨天的毛细管（昨天用完有冲洗）不出峰，活化了几根毛细管还是什么都不出峰，电流正常。
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小冬1106
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2015/5/6 23:21:28 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 nini2006(nini2006) 发表:
用的什么仪器？光是你测的物质不出峰还是不论进什么样（如电渗流标记物等）都没任何响应？
我还没用压力试过，但是在进样前预处理过程中进样水，NaOH，水时其吸光度明显变化，这样说来是不是可以排除灯的问题？
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CEcret
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2015/5/7 8:48:33 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你分析的是什么化合物？用的什么缓冲体系？上个图我们才好帮你分析分析啊
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小冬1106
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2015/5/7 9:01:03 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 CEcret(v2812644) 发表:
你分析的是什么化合物？用的什么缓冲体系？上个图我们才好帮你分析分析啊
分析阿尔法葡萄糖苷酶和底物的反应混合物，主要检测其中的产物对硝基苯酚，这个和化合物缓冲体系应该没关，之前一直是这样分的，分的很好。
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小冬1106
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2015/5/7 9:01:22 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 CEcret(v2812644) 发表:
你分析的是什么化合物？用的什么缓冲体系？上个图我们才好帮你分析分析啊
分析阿尔法葡萄糖苷酶和底物的反应混合物，主要检测其中的产物对硝基苯酚，这个和化合物缓冲体系应该没关，之前一直是这样分的，分的很好。
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nini2006
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2015/5/7 20:01:57 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 小冬1106(v2785634) 发表:
我还没用压力试过，但是在进样前预处理过程中进样水，NaOH，水时其吸光度明显变化，这样说来是不是可以排除灯的问题？
应该不是灯的问题，如果灯接近寿命基线会很反常的。没试过压力是什么意思？你现在进样是压力进样吧？如果不是的话赶紧试试。要检查是否是压力系统出问题导致进样不成功可以将样品换成水，较长时间进样，然后管擦毛细管出口端是否有液滴流出。
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CEcret
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2015/5/11 21:32:53 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 小冬1106(v2785634) 发表:
分析阿尔法葡萄糖苷酶和底物的反应混合物，主要检测其中的产物对硝基苯酚，这个和化合物缓冲体系应该没关，之前一直是这样分的，分的很好。
如果分析酚类化合物，一般采用碱性缓冲体系，而在这样电渗流比较大的体系中，不管什么东西都应该比较快的出来了。
该帖子作者被版主 nini2006加 3积分， 2经验，加分理由：应助
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王2015
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2015/5/12 14:35:11 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
灯应该没问题，看看管子是不是好的
当然也有可能机器最近就是不工作，我碰到过这种情况
该帖子作者被版主 nini2006加 2积分， 2经验，加分理由：参与
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ericwong
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2015/5/19 11:27:09 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主遇到的情况现在有没有好一些呢？
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