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主题：【求助】液相梯度出峰，等度不出峰的问题

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bbbff
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发表于：2015/12/30 17:58:47 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我最近在做一个多肽(体系中只有一个物质)的液相谱图，反相C18的柱子，流动相是乙睛B水A,千分之一的三伏乙酸。用梯度洗脱0-25min ,24%-49%，在19分钟能够出峰，但是之后用70%的乙睛等度洗脱，无法出峰。请问问这是为什么呢？实验重复做了几遍，确认仪器设备没有问题，就是梯度能出等度不能出，就想问问能不能知道为什么？
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emoc98311
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2015/12/31 10:42:48 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
那个峰不一定就是多肽的峰
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hujiangtao
hujiangtao
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2015/12/31 11:01:34 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这个峰怎么和气相的峰类似？一般液相出不来这么尖锐的
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夏天的雪
bingwang228
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2015/12/31 13:42:48 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
有可能是梯度转换时产生的峰，并不一定是待测物质的峰
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lsyecspc
liushuyong
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2015/12/31 13:45:14 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
梯度PH会发生变化，看看您做的多肽在不同PH下有什么变化。
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bbbff
v2910922
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2016/1/1 9:30:44 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由hujiangtao(hujiangtao)发表:这个峰怎么和气相的峰类似？一般液相出不来这么尖锐的
忘记说明了。这个是该多肽的质谱图，液相图是普通的图，没有上
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bbbff
v2910922
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2016/1/1 9:31:05 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由lsyecspc(liushuyong)发表:梯度PH会发生变化，看看您做的多肽在不同PH下有什么变化。
学习了，谢谢
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bbbff
v2910922
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2016/1/1 9:31:41 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由夏天的雪(bingwang228)发表:有可能是梯度转换时产生的峰，并不一定是待测物质的峰
学习了，我再试试看，谢谢
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seannoy
v2723283
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2016/1/4 9:32:36 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可能和背景吸收等有关  我们这边做多肽也有梯度出峰 等度不出峰的现象 
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52nimo
52nimo
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2016/1/12 12:53:18 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你用70%的乙睛等梯度时，有加离子对试剂三氟乙酸吗？
这个很重要，你描述里没提
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支点
zhx_fs_ln
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2016/1/15 14:31:33 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
24%-49%的梯度，为什么直接就是70%的等度,低一些的等度试过么
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