主题：【第九届原创】赛默飞U3000自动进样器自定义进样功能开发-柱前在线衍生

赛默飞U3000液相自动进样器做柱前衍生的步骤
软件版本：变色龙6.8中文版（7.2版本相同）
总体流程：在创建程序过程中选择“用户自定义”进样模式，在“用户自定义程序界面”建立柱前衍生程序，首先设置好衍生试剂瓶位置和制备瓶位置，从试剂瓶吸取定量的衍生试剂V1和从样品瓶吸取定量的样品V2，然后开始混合，吸取V1+V2体积的空气，然后设置注射器排出这部分空气，之后设置注射器装载和卸载同体积的空气，按需求添加，保证良好的混合效果，混合后可以设置等待一段时间，之后若需添加其它衍生试剂，只需按上述步骤添加混合即可，最后添加进样命令，并添加洗针和清洗注射器命令，完毕。
1、点击“序列控制”界面中的“创建程序”，按实验方法设好需要的柱温、流速、梯度、波长等参数，进样模式先选“Normal”，点击完成。

出现以下界面，

2、点击界面左侧中的 ，在“进样模式”下选 “UserProg”，然后点击“用户自定义程序”，开始编辑衍生程序。

“用户自定义程序”界面有8个试剂瓶，每个试剂瓶都可以指定样品盘上的一个位置去担当，这里“试剂A”我选择“RA1”，制备瓶可以是固定的一个小瓶，也可以每个样品瓶跟一个制备瓶，“命令”菜单就是具体编辑进样器动作的地方了。（制备瓶只有在针外混合时才有意义，针内混合不起作用，因此可以设置一个固定小瓶）
3、选择“UdpDraw”，从试剂A以3UL/S的速度吸取5UL衍生试剂，点击插入

4、选择“UdpDispense”，将衍生试剂注射到制备瓶中（这是将样品和衍生试剂注射到衍生瓶里进行衍生，适合大剂量的衍生，取样量少的话可以不用此步，直接在进样针内衍生即可，可以提高衍生的效果，下面就按进样针内衍生的方法编程）

5、从样品瓶吸取0.5ml样品

6、开始衍生试剂和样品的混合，从Air吸取5.5ml空气

7、将空气排出，选择“UdpMoveSyringe”，选择“卸载”，5.5UL，此为一个混合周期，之后选择装载、卸载相同的体积来混合。

8、选择“UdpMoveSyringe”，选择“装载”，5.5UL，再卸载，添加足够的混合次数，最后以卸载结束，混合结束后添加洗针命令，这里选择体积100UL，之后可以选择等待一段时间

9、选择“UdpMixWait”，这里选择等待12秒后继续之后的操作，之后可以选择吸取另一种衍生试剂进行混合（按上述步骤即可）或设置进样命令。

10、设置进样命令，先插入“UdpInjectMarker”命令，之后插入“UdpInjectValve”命令，位置“Inject”，插入“UdpSyringValve”命令，位置“Waste”，至此衍生和进样命令编辑完毕。

11、可以设置之后的清洗程序，可以将此自定义程序存为单独的模板，也可以直接保存到程序里面。

7.2版本变色龙软件程序编辑过程类似，如下图

补充：柱前衍生由于衍生效果会影响到检测结果，用户可以根据自己的条件调整混合次数和各衍生试剂及样品的进样量，以求达到较好的衍生效果，获得更好的线性和重复性。