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液相色谱（LC）

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主题：【求助】梯度洗脱程序

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sunny阳

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发表于：2017/03/01 11:03:29 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

想用超高效液相--蒸发光散射监测器测二硝托胺及代谢物，用乙腈：0.1%甲酸水（75：25）等度洗脱时，两者出峰时间基本重合了；梯度洗脱还没弄出来，我该怎样设梯度程序呢大神指导，注：代谢物极性大

该帖子作者被版主 夏天的雪加 2积分， 2经验，加分理由：鼓励发帖

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2017/3/1 11:40:00 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

液相走梯度的话，一般是低比例有机相到高比例有机相的，最开始的时候可以把比例变化速度设置的慢一些，跑样时间长一些，1个钟左右吧，先确定出峰时流动相的比例变化范围。Ps：要把流动相从泵到色谱柱检测器的时间算进去

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夏天的雪

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2017/3/1 11:56:56 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

先走等度看能否分出来，然后再考虑梯度，进行优化

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小鱼儿111126

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2017/3/1 14:28:06 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

楼主的化合物极性比较大，建议先走一个有机相比例比较低的等度（20%以下）。看看分离效果如何。如果两者还是重合严重的话，估计梯度也分不开了。可能需要重新优化流动相（pH,添加剂等）。或者更换适合大极性的色谱柱（HILIC机理色谱柱）。

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有水有渝

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2017/3/3 14:35:51 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

不知道两都的结构和理化性质差多少，当前方法下保留时间分别是多少？

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sunny阳

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2017/3/3 20:48:49 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
不知道两都的结构和理化性质差多少，当前方法下保留时间分别是多少？

时间基本一个样

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sunny阳

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2017/3/3 20:49:52 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 sunny阳(p3131909) 发表:
时间基本一个样

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夏天的雪

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2017/3/4 10:27:25 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

好像有相关文献的，是否可以参考一下

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有水有渝

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2017/3/4 17:09:30 8楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

对于代谢物的检测方法文献好像不多
超高效液相色谱法测定鸡组织中二硝托胺及其代谢产物残留量

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sunny阳

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2017/3/4 20:40:38 9楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:我用的是ELSD检测器，按照这个梯度也分离不出来，所有的条件仪器都一样
对于代谢物的检测方法文献好像不多
超高效液相色谱法测定鸡组织中二硝托胺及其代谢产物残留量

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sunny阳

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2017/3/4 20:41:38 10楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 夏天的雪(bingwang228) 发表:
好像有相关文献的，是否可以参考一下

按照参考文献，洗脱不出来啊

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手机版： 梯度洗脱程序

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