紫外可见分光光度计(UV)

主题:【求助】GB/T 5750.11-2006做氯胺的曲线做不出来

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Insm_7ef2755b
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GB/T  5750.11-2006 中做氯胺的曲线要求参照 N,N-二乙基对苯二胺(DPD)分光光度法来做。
做的过程中药品试剂都是新配的,氯标准溶液是用高锰酸钾配的,浓度为1ug/ml,按照标准取0  ,  0.1  ,  0.5  ,  1.0  ,  2.0  ,  4.0  ,  8.0  氯标准溶液于6支10ml比色管中,定容,然后加0.5ml磷酸盐缓冲液和0.5mlDPD,然后在515nm下测定。
现在出现的问题是加完试剂混匀后是有颜色梯度的,但是曲线就是拉不出来,但在测吸光度的那几分钟里式样颜色将的特别快。之后又重新做,并请人帮忙,我这边刚加完试剂,另一个人就立即测吸光度,这样速度快了很多,但是依然没有式样颜色降低的速度快,所以依然没有做出来。后来我想是不是我配的氯标准溶液太低了,导致它不稳定,然后重新配了2ug/ml和5ug/ml的,依然还是做不出。。。。。
太迷茫了,我试剂没配错,操作也没错,想知道温度对它有没有什么影响,但也差不多什么可靠的答案。标准上说用无需氯水开做,需要用到漂粉精,但是我们实验室没有,配不了无需氯水,用新煮沸冷却的纯水来做没多大影响的吧?还是我配的氯标准溶液浓度太低,导致它十分不稳定?但是标准只说要配1ug/ml的,没有其他的,同时也没有补充其他需要注意的细节。。。我真的没法了。。。。哪位大神能给我指点迷津啊?谢谢了
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郭景祎
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既然标准要求还是按照标准来,配制无需氯水。我们做的是1.2的方法,没做过第一法
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工作曲线系列的吸光度本身就是比较小的,另外不知道你的空白情况如何?
Insm_7ef2755b
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原文由 郭景祎(guojingyi-2010) 发表:既然标准要求还是按照标准来,配制无需氯水。我们做的是1.2的方法,没做过第一法
你做的1.2法的结果怎么样?上面要求用1.1法做,用1.2法可以吗?
Insm_7ef2755b
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原文由 我是风儿(nphfm2009) 发表:工作曲线系列的吸光度本身就是比较小的,另外不知道你的空白情况如何?
我做的一组失败的数据
0.000    0.001      0.005      0.015        0.026        0.030
做了好几次,空白吸光度最大就是0.003,越往后吸光度值越不正常,因为溶液的颜色一直在下降
Insm_7ef2755b
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原文由 我是风儿(nphfm2009) 发表:上传两篇文章给你看下,应该对你有帮助的
好的,谢谢
m3283090
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原文由 郭景祎(guojingyi-2010) 发表:既然标准要求还是按照标准来,配制无需氯水。我们做的是1.2的方法,没做过第一法
无需氯水需要漂粉精,尴尬的是刚好没有
Insm_e13f9b13
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郭景祎
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原文由 Insm_7ef2755b(Insm_7ef2755b) 发表:你做的1.2法的结果怎么样?上面要求用1.1法做,用1.2法可以吗?
我们一直用比色盒,也没啥问题,认证也是可以的,反正是现场检测