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主题：【已应助】关于液相色谱 5个标准样 出峰重叠问题？

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echong1982
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发表于：2019/12/07 21:42:05 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我今天下午做的实验是测定5‘-核苷酸
我总共有5个标准样，用的混标法

流动相：是甲醇1：1 （体积）0.05mol/L磷酸二氢钾溶液,刚开始是15分钟甲醇冲洗柱子，然后15分钟流动相冲洗，然后5ul进样
结果，就在3分钟左右的时候出了2个峰，其余的到20分钟都没出峰

之后我又把每个样品单独跑了一遍，结果是第一种：出峰时间是3.615S，第二种是3.598S，第三种是3.625S，第四种是3.576S，第五种是3.616S时，出峰。
本人新手，我感觉好像是峰都重叠在一起了

请问各位一下，怎么把这5种混标时，出峰分离开来。
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echong1982
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2019/12/7 21:42:34 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你是什么柱子，如果是很快就出峰肯定是流动相极性太高了吧，可以降低流动相的极性，分不开的话应该试试梯度洗脱是可以分开的，不可能用等度都能分开，特别是你单独样品走的时候时间好像也差不多，个人看法哦！
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