主题:【活动】积分商城京东卡申领活动第二期(获奖结果已发布)

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如在变性高效液相色谱检测法(DHPLC)在基因突变分析中的应用,DHPLC是近年来发展起来的一项相对较新的能够满足大规模基因变异检测筛查的技术。1995年,Oefner和Underhill将这项技术推荐为用于突变检测的新方法。DHPLC技术是一项在SSCP和DGGE基础上发展起来的新的杂合双链突变检测技术,其原理与DGGE类似,即通过HPLC在部分变性的条件下可将发生错配的异源杂合双链DNA和完全匹配的同源双链DNA分离开来。它具有廉价省时、节约劳动力、灵敏性高、特异性强等优点。
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现在,在药品质量标准中,对有关物质检查的要求越来越高,一个药物从合成原料到制备有关的制剂,再经过贮备、运输、使用,要经过一段较为复杂和漫长的过程,在此期间,每一个过程都有可能产生有关的物质,如生产中可能带入原料、试剂、中间体、副产物和异构体等;在贮备和运输过程中,可能产生降解产物,聚合物等。为了保证药物的安全有效。同时也要考虑到生产的实际情况。因此,对药物的研究,可以允许有一定量的无害或低毒性的有关物质液相仪器各厂家的仪器展。还有对药品的含量测定,中药成分的检验。
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由于化学工业的发展和天然化合物的开发,使得环境污染越来越严重。据报道被确认为环境污染物的已超过350种,人们能在水中、空气中、污泥里、鱼、禽体内发现这些污染物。通过食物链,它们将进一步污染肉类、蛋类、粮食、蔬菜等。环境污染的检测早已成为分析化学中重要的研究课题之一。
HPLC已在环境监测中得到广泛应用,特别适用于分子量大、挥发性低、热稳定性差的有机污染物的分离和分析如多环芳烃、酚类、多环联苯、邻苯二甲酸酯类、联苯胺类、阴离子表面活性剂有机农药、除草剂等,其中多数属于美国环保局(EPA)清洁水法案中颁布的114项
优先有机污染物范围。
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HPLC可以广泛地用于检测食品的农药残留,食品中过量的食品添加剂,食品中违禁成分;也可用于食品中营养成分的分析。
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HPLC法可以测定肉制品中的兽药残留、致癌物质含量等。腌腊肉品中常添加硝酸盐或亚硝酸盐作发色剂用,由于添加量过大或自身的还原作用在肉品中生成N-亚硝胺。N-亚硝胺可诱发肝癌、结肠癌等。过去采用气相色谱法测定食物中挥发性亚硝胺,其中仅色谱测定一步便需耗时1 h之多,而采用高效液相色谱法则只需要13 min左右。
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3.1.1 在乳品分析中的应用
乳及乳制品的质量评价比较复杂,包括营养成分及含量、乳品的风味物质、药物残留和毒物种类及含量等多个方面,HPLC法可用于乳品中多种质量控制指标的检测。乳及乳制品中富含糖、脂、蛋白质、维生素等营养以及强化的营养物质,HPLC技术几乎可用于各种营养成分的检测。在低分子糖类的测定中多采用氨基键合柱、糖类分析专用柱进行分离,也有研究者利用低成本非特定色谱柱测定低分子糖。
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5.5蒸发光检测器
蒸发光检测器(evaporationla sersp urtd etector,ELSD)是质量型、高灵敏度的通用液相色谱检测器。它检测的三个主要过程为 (1)雾化:色谱柱流出物经过针头式的细导管进人雾化器,与气体混合喷成均匀一致的雾滴;(2)蒸发:雾滴经过加热的漂移管,流动相被蒸发,溶质形成极细的颗粒;(3)检测:溶质颗粒气体在检测池发生散射作用,经光电倍增管成电信号输出。基于它的工作原理,原则上对所有的化合物都能测定,不论化合物是否存在生色团或电活性基团;检测器的响应直接与被洗脱化合物的质量有关,对未知物可以得到准确的定量;因在检测前被洗脱的化合物已除去流动相,适用于梯度洗脱。由于它的这些优点,它有可能像气相色谱中的氢火焰检测器(FID)那样成为液相色谱的高灵敏度通用检测器。
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5.4荧光检测器
现代的荧光检测器具有高的灵敏度和可靠性,可用波长时间程序自动切换激发、发射波长在多组分分析时可切换到各组分的最佳分析波长,实现高灵敏度和高效率。利用波长扫描功能,可在工作站系统控制器的画面上显示目的成分的激发、发射光谱,很容易进行最佳波长的选定。
荧光检测器具有高灵敏度、高选择性,对多环芳烃,维生素B、黄曲霉素、卟啉类化合物、农药、药物、氨基酸、甾类化合物等有响应。
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示差折光检测器是除紫外检测器之外应用最多的检测器,可连续检测参比池和样品池中流动相之间的折光指数差值。差值与浓度呈正比,也是一种通用型检测器(每种物质具有不同的折光指数),缺点是灵敏度低、对温度敏感、不能用于梯度洗脱;有偏转式、反射式和干涉型三种;
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二极管阵列检测器可以记录190nm-900nm波长吸收光谱数据,可直接贮存色谱图中每一个点的吸收光谱。光源发出的光,通过透镜把光聚焦在检测池上。从检测池出来的光,通过透镜、狭缝到全息光栅上,经光栅分光后由一排光电二极管接收并转换为电信号,贮存于计算机中。DAD的最大优点在于利用UV光谱识别并进行纯度分析,还可以画出保留时间、波长和吸光度的三维立体空间谱图等,这是目前较先进的紫外检测器。
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