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液相色谱（LC）
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主题：【已应助】液相色谱不出峰

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发表于：2021/05/11 20:00:44 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
液相色谱测样，柱子是安捷伦C18柱，前期测样都正常，突然只出水峰，不出样品峰了，压力显示正常，会是哪里出问题了呢??
推荐答案：myoldid回复于2021/05/13
1， 首要检查压力是否正常，如果压力明显异常，建议处理压力波动，如果压力正常，请参考第2步

2， 请用金属两通代替色谱柱，方法不变进样，如果出峰请参考第3步。如果不出峰请跳到第5步。

3， 此时怀疑色谱柱和流动相问题，建议更换色谱柱和流动相（强烈建议流动相新配！并确认流动相所在瓶子正确，千万别出现A通道本来该是甲醇，结果放成了水），如果仍然不出峰，请参考第4步。

4， 此时怀疑流动相比例问题，如果是四元泵请尝试比例阀断电测试，如果测试失败，请联系工程师，如果测试通过，也请联系工程师继续排查。

5， 检查样品瓶液面是否高于0.5mL，并确认样品瓶位置正确。并检查进样器方法中进样高度的设置，如果低于0.5mL，建议使用内衬或者增加样品量，如果高于0.5mL, 请参考第6步。

6， 检查方法波长设置是否和文献一致，特别注意使用工作站时，看看检测器有没设置时间程序（比如初始波长220nm，5min后切换为320nm，那本来该用220nm检测的样品再5min后就很可能不能出峰了）。进样体积不能为0（特别检查序列表中进样体积），进样位置不能为空白。如果方法设置均正常，请参考第7步。

7， 查看紫外灯累计开启时间，利用Lab advisor做氘灯能量测试、流通池测试，检查流通池安装的位置，如果测试不通过，请联系工程师。如果测试都通过，请参考第8步。

8， 检查进样器是否有吸样的动作，样品是否有减少，计量泵和六通阀是否有微漏或者故障等情况。
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xiaogumd11
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2021/5/12 9:46:54 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
1、水峰和样品峰保留时间相隔远不远，有可能水峰过大，拖尾掩盖样品峰
2、样品峰在前处理等，损失了，或是没有提取出来。
3、C18色谱柱柱效果下降，并伴有灵敏度降低。原来 该出峰的位置，不出峰了
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小精钢
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2021/5/12 11:30:57 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
读个标液，看是否出峰，如果不出，看看是否进样针堵塞，或者检测器的问题。
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安平
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2021/5/12 15:27:41 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
详细说说具体分析条件为好，详细说说样品的具体情况为好，有图有真相。
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Insm_99bfcea9
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2021/5/12 16:53:18 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
具体问题具体分析，说得太笼统了
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myoldid
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2021/5/13 11:23:01 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
1， 首要检查压力是否正常，如果压力明显异常，建议处理压力波动，如果压力正常，请参考第2步

2， 请用金属两通代替色谱柱，方法不变进样，如果出峰请参考第3步。如果不出峰请跳到第5步。

3， 此时怀疑色谱柱和流动相问题，建议更换色谱柱和流动相（强烈建议流动相新配！并确认流动相所在瓶子正确，千万别出现A通道本来该是甲醇，结果放成了水），如果仍然不出峰，请参考第4步。

4， 此时怀疑流动相比例问题，如果是四元泵请尝试比例阀断电测试，如果测试失败，请联系工程师，如果测试通过，也请联系工程师继续排查。

5， 检查样品瓶液面是否高于0.5mL，并确认样品瓶位置正确。并检查进样器方法中进样高度的设置，如果低于0.5mL，建议使用内衬或者增加样品量，如果高于0.5mL, 请参考第6步。

6， 检查方法波长设置是否和文献一致，特别注意使用工作站时，看看检测器有没设置时间程序（比如初始波长220nm，5min后切换为320nm，那本来该用220nm检测的样品再5min后就很可能不能出峰了）。进样体积不能为0（特别检查序列表中进样体积），进样位置不能为空白。如果方法设置均正常，请参考第7步。

7， 查看紫外灯累计开启时间，利用Lab advisor做氘灯能量测试、流通池测试，检查流通池安装的位置，如果测试不通过，请联系工程师。如果测试都通过，请参考第8步。

8， 检查进样器是否有吸样的动作，样品是否有减少，计量泵和六通阀是否有微漏或者故障等情况。
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