紫外可见分光光度计(UV)

主题:【已应助】关于紫外分光光度计曲线问题

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1.做曲线时 什么时候需要扣除空白吸光度,是以水为参比吗?以试剂空白或溶液空白校零的不需要扣除空白吸光度?
2.为什么要扣除空白吸光度啊,我今天做的硫化氢曲线扣除空白吸光度后的曲线截距为负,计算样品结果反而增大了,截距是为负好还是正好
3.5009.182铝里,以空白溶液为参比,公式里为什么还要计算空白溶液中铝的质量,不就是0了?
最佳答案:JOE HUI回复于2021/07/06
1.做曲线时 什么时候需要扣除空白吸光度,是以水为参比吗?以试剂空白或溶液空白校零的不需要扣除空白吸光度?
仪器会有不同的波动,空白吸光度的数值不会完全稳定在0.000abs,多次测定只会接近0。分析时,直接分析标准曲线系列的试剂空白吸光度(与曲线配置一样,只是不加标液);也可以用其他介质(比如以水为参比)调零,然后测定标准空白的吸光度值,再测定标准系列的吸光度,计算时扣除掉标准空白的吸光度值(一般软件都有自动扣除的功能)。
2.为什么要扣除空白吸光度啊,我今天做的硫化氢曲线扣除空白吸光度后的曲线截距为负,计算样品结果反而增大了,截距是为负好还是正好?
样品空白也跟标准空白一样,可以采用直接调零的方式,直接测定吸光度值也可以采用直接测定样品空白吸光度,然后再检测样品吸光度,再计算扣除掉的样品空白后的吸光度值,代入标准曲线计算浓度。 曲线截距大小基本上没有明确的规定,但是截距肯定是越小越好,空白跟截距是有关的,空白一般控制在检出限以下, 截距大了就会使得曲线测低浓度测不准,所以要想办法降低本底干扰,尽可能把截距降下来.除空白吸光度后的曲线截距为负情况肯定是异常的,需要判断此时截距是否合理
3.5009.182铝里,以空白溶液为参比,公式里为什么还要计算空白溶液中铝的质量,不就是0了?
以空白溶液为参比,空白应该有吸光度吧,不能忽视空白溶液中铝的吸光度吧!做为样品空白结果,计算时候需要考虑
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JOE HUI
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1.做曲线时 什么时候需要扣除空白吸光度,是以水为参比吗?以试剂空白或溶液空白校零的不需要扣除空白吸光度?
仪器会有不同的波动,空白吸光度的数值不会完全稳定在0.000abs,多次测定只会接近0。分析时,直接分析标准曲线系列的试剂空白吸光度(与曲线配置一样,只是不加标液);也可以用其他介质(比如以水为参比)调零,然后测定标准空白的吸光度值,再测定标准系列的吸光度,计算时扣除掉标准空白的吸光度值(一般软件都有自动扣除的功能)。
2.为什么要扣除空白吸光度啊,我今天做的硫化氢曲线扣除空白吸光度后的曲线截距为负,计算样品结果反而增大了,截距是为负好还是正好?
样品空白也跟标准空白一样,可以采用直接调零的方式,直接测定吸光度值也可以采用直接测定样品空白吸光度,然后再检测样品吸光度,再计算扣除掉的样品空白后的吸光度值,代入标准曲线计算浓度。 曲线截距大小基本上没有明确的规定,但是截距肯定是越小越好,空白跟截距是有关的,空白一般控制在检出限以下, 截距大了就会使得曲线测低浓度测不准,所以要想办法降低本底干扰,尽可能把截距降下来.除空白吸光度后的曲线截距为负情况肯定是异常的,需要判断此时截距是否合理
3.5009.182铝里,以空白溶液为参比,公式里为什么还要计算空白溶液中铝的质量,不就是0了?
以空白溶液为参比,空白应该有吸光度吧,不能忽视空白溶液中铝的吸光度吧!做为样品空白结果,计算时候需要考虑
Insm_b5f00eea
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1,试剂空白,就是没有待测物的液体,和样品一样添加各种显色剂和处理流程。
扣除试剂空白,就是用试剂空白调零仪器。
以某某为参比,也是用某某把仪器调零。

以水为参比,是用水调零仪器(单光束),或把水放在参比侧(双光束)。
如果你思路转不过来,把双光束当成单光束用就行。

2,标准曲线的截距一般是不用参与计算的
Y轴是吸光度,X轴是浓度,这是标准的常见方式。
y=ax+b
浓度x=吸光度y/a-b,一般情况下这个b很小,减不减影响不大,有些标准里忽略,有些标准里却有。
如果截距很大,一般是曲线出了问题,一般是做的时候没有用试剂空白调零(扣除试剂空白吸光度)。