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紫外可见分光光度计（UV）

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主题：【已应助】关于紫外分光光度计曲线问题

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发表于：2021/07/05 18:35:14 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

1.做曲线时什么时候需要扣除空白吸光度，是以水为参比吗？以试剂空白或溶液空白校零的不需要扣除空白吸光度？
2.为什么要扣除空白吸光度啊，我今天做的硫化氢曲线扣除空白吸光度后的曲线截距为负，计算样品结果反而增大了，截距是为负好还是正好
3.5009.182铝里，以空白溶液为参比，公式里为什么还要计算空白溶液中铝的质量，不就是0了？

推荐答案：JOE HUI回复于2021/07/06

1.做曲线时什么时候需要扣除空白吸光度，是以水为参比吗？以试剂空白或溶液空白校零的不需要扣除空白吸光度?
仪器会有不同的波动，空白吸光度的数值不会完全稳定在0.000abs，多次测定只会接近0。分析时，直接分析标准曲线系列的试剂空白吸光度(与曲线配置一样,只是不加标液)；也可以用其他介质（比如以水为参比）调零，然后测定标准空白的吸光度值，再测定标准系列的吸光度，计算时扣除掉标准空白的吸光度值（一般软件都有自动扣除的功能）。
2.为什么要扣除空白吸光度啊，我今天做的硫化氢曲线扣除空白吸光度后的曲线截距为负，计算样品结果反而增大了，截距是为负好还是正好?
样品空白也跟标准空白一样，可以采用直接调零的方式，直接测定吸光度值也可以采用直接测定样品空白吸光度，然后再检测样品吸光度，再计算扣除掉的样品空白后的吸光度值，代入标准曲线计算浓度。曲线截距大小基本上没有明确的规定，但是截距肯定是越小越好，空白跟截距是有关的，空白一般控制在检出限以下，截距大了就会使得曲线测低浓度测不准，所以要想办法降低本底干扰，尽可能把截距降下来.除空白吸光度后的曲线截距为负情况肯定是异常的,需要判断此时截距是否合理
3.5009.182铝里，以空白溶液为参比，公式里为什么还要计算空白溶液中铝的质量，不就是0了？
以空白溶液为参比,空白应该有吸光度吧,不能忽视空白溶液中铝的吸光度吧!做为样品空白结果,计算时候需要考虑

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2021/7/26 11:00:31 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

1，试剂空白，就是没有待测物的液体，和样品一样添加各种显色剂和处理流程。
扣除试剂空白，就是用试剂空白调零仪器。
以某某为参比，也是用某某把仪器调零。

以水为参比，是用水调零仪器（单光束），或把水放在参比侧（双光束）。
如果你思路转不过来，把双光束当成单光束用就行。

2，标准曲线的截距一般是不用参与计算的
Y轴是吸光度，X轴是浓度，这是标准的常见方式。
y=ax+b
浓度x=吸光度y/a-b，一般情况下这个b很小，减不减影响不大，有些标准里忽略，有些标准里却有。
如果截距很大，一般是曲线出了问题，一般是做的时候没有用试剂空白调零（扣除试剂空白吸光度）。

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