液相色谱柱活化及保养维护
色谱柱活化
新的色谱柱活化,实际上是一个平衡的过程,活化之前必须查看包装内配套说明书,并按说明书上联系方式,与供应商核实色谱柱内保存溶剂及推荐活化步骤,若无推荐步骤可参考如下活化步骤:
1. 反相柱活化流程:
①甲醇或乙腈冲洗20倍柱体积;
②若流动相含有缓冲盐,用跟流动相中盐相等比例的超纯水和有机相冲洗过渡,用量为20倍柱体积,再用含缓冲盐的流动相平衡色谱柱,用量为20倍柱体积或以上;
③若流动相不含缓冲盐,用流动相平衡色谱柱,用量为20倍柱体积或以上;
④最终到压力基线平稳,若不平稳可延长平衡时间。
2. 正相柱活化流程:
2.1 保存溶剂为正相溶剂时:
若使用正相溶剂做流动相,可用正相流动相冲洗20倍体积。一般先用异丙醇冲洗50倍体积,可用0. 2mL/min流速,再用流动相(乙腈/水)平衡50倍体积。
2.2 保存溶剂为反相体系时:
若使用反相体系做流动相,使用反相溶剂冲洗20倍体积后即可使用。若使用正相体系做流动相先用异丙醇冲洗50倍体积,可用0. 2mL/min流速,再用正相流动相平衡50倍体积。
色谱柱的保养
1. 色谱柱应轻拿轻放,避免碰撞振动,放置和归还时,相应上机人员应确认保存在合适的溶剂中,并确认色谱柱两端的堵头已旋紧。
2. 色谱柱压力升高时,应按照“标题三”步骤进行维护,色谱柱维护应在色谱柱档案备注中注明。
3. 当出现色谱柱峰高降低,峰宽加大或出现肩峰及柱效下降时。应按照“标题四”原则进行色谱柱再生,色谱柱再生应在色谱柱档案备注中注明。
4. 当色谱柱维护及再生后,柱效、柱压仍然不满足要求,则上报相关负责人,经负责人评估后认为确需报废的应在色谱柱档案中做好报废记录,报废后的色谱柱应专门存放,以便将来可以利用其填料修复被严重污染的色谱柱。,
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