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植物中17种游离氨基酸测定方法
NaHCO3，二硝基氟苯，KH2PO4，N,N-二甲基甲酰胺，乙酸钠均为分析纯，乙腈为色谱级，超纯水。Phenomenex Gemini NX C18（4.6 mm×250 mm, 5 μm），HPLC（LC-20AT）日本岛津。
2. 液相色谱条件。色谱柱：Phenomenex Gemini NX C18（4.6 mm×250 mm, 5 μm）；流动相：
A为0.05 mol/L乙酸钠（pH=6.4，含0.1% N,N-二甲基甲酰胺和10%乙腈），B为乙腈:水（体积比为1:1）；流速：1.0 mL/min；柱温：35 ℃；检测波长：360 nm；进样量：10 μL，梯度洗脱程序见表1。
表1 液相梯度洗脱程序
称取2.0 g样品，精密称定，沸水提取1 h，过滤，滤液定容至50 mL，取上述滤液0.1 mL于10 mL容量瓶中，加入0.5 mL 0.5 mol/L NaHCO3溶液，调pH到8.5，加入0.5 mL 1%二硝基氟苯衍生化试剂，混匀后60 ℃恒温水浴60 min，然后用0.1 mol/L KH2PO4试液定容至10 mL，上机检测。
4. 实验结果：
采用柱前衍生法测定亚麻荠植株中的游离氨基酸，采用液相色谱法进行检测，由图1可知，各氨基酸对应的峰分离效果较好，共检测出13种氨基酸，氨基酸的组成及含量见表2。
图1 游离氨基酸液相色谱图
表2 亚麻荠植株中游离氨基酸组成及含量
注：*为必需氨基酸，“一”代表未检出
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