主题:【资料】特殊染色技术的原理及其在实践中的应用

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HE染色,全称为苏木精-伊红染色法 (hematoxylin-eosin staining),是最基本的病理学染色技术,能够对正常组织和病理组织进行形态结构的观察。特殊染色是常规HE染色的必要补充,能够有针对性地对组织成分进行染色,使组织病理学评价更加完善精确,在临床病理学诊断和病理组织学研究具有重要的应用价值。除常规的HE染色外,义翘神州还提供9种特殊染色服务,包括masson三色染色、 PAS染色、尼氏染色、VG染色、苏丹黑染色、普鲁士蓝染色、油红O染色和β-半乳糖苷酶衰老染色等。



为了显示与确定组织或细胞中的正常结构或病理过程中出现的异常物质、病变及病原体等,需要分别选用相应的显示这些成分的染色方法进行染色。包括: 胶原纤维 染色(Masson)、网状纤维染色、弹力纤维染色、肌肉组织染色(磷钨酸 苏木素 )、脂肪染色(苏丹III)、糖原染色(PAS)、粘液染色(PAS)等。



特殊染色:

病理组织切片染色技术作为病理实验室基本方法之一,具有较高的使用价值,也是目前临床外科病理最基本、最常见的形态学检验技术。



实验原理:

组织切片染色就是利用染料在组织切片上给予不同颜色,使其与组织或者细胞内的某种成分发生作用,经过透明后通过光谱吸收和折射,使其各种微细结构能显现不同颜色,这样在显微镜下就可显示出组织细胞的各种成分。最常见的组织染色是HE染色,另外巴菲尔生物还可开展其他特殊染色项目,如masson染色、PAS染色、AB-PAS染色、EVG染色、VG染色、维多利亚蓝染色、番红-固绿染色、甲苯胺蓝染色、油红O染色、阿利新蓝染色、碱性磷酸酶染色、瑞氏姬姆萨染色、普鲁士蓝染色、TTC染色及髓鞘染色等。



特殊染色的应用价值

现代病理学中免疫组织化学技术、电子显微镜技术以及其它细胞及分子生物学技术应用日益广泛,但由于这些技术要求一定的实验条件以及所需的试剂价格较为昂贵,对于一部分病人以及某一些基层医院是比较难以接受的。而组织化学技术则具有无需复杂的实验条件以及较为昂贵的试剂操作又比较简单的优势,在临床病理学诊断中具有重要的应用价值。



比如,当细胞中出现色素,是黑色素还是含铁血黄素以及当组织中出现均一化学物质是否为淀粉样变性等,用组织化学技术区别起来很简单,所以组织化学技术,虽然已有几十年到几百年的历史,仍是一个很有实用价值的技术。



常见的特殊染色方法及应用:

1Mallory磷钨酸苏木素染色

原理:成熟的苏木素通过钨的结合成蓝色色淀,这种色淀与所选择的组织成份能牢固地结合而呈蓝色,显示棕红色的成份是由于磷钨酸而着色。

方法应用:

临床上应用该方法对横纹肌肉瘤进行诊断,横纹肌肉瘤的组织学形态变化多样,与未分化的间胚叶肿瘤很难鉴别,采用磷钨酸苏木素染色,在瘤细胞质内发现蓝色横纹,则可以证明该肿瘤是呈横纹肌分化。该染色液也可以对炎症渗出的纤维素,DIC的毛细血管中的纤维素、以及神经病理等方面进行染色



2PAS染色

原理:高碘酸是一种氧化剂,它能破坏多糖结构的碳键。组织切片首先用高碘酸溶液氧化,使存在于组织多糖分子的乙二醇基或氨羟基的碳键打开,生成醛基化合物。暴露出来的游离醛基与无色品红溶液作用,生成新的红至紫红色复合物而得到定位。

应用:

在组织学上,主要用来检测组织中的糖类。随着医学实验技术的发展,糖原染色应用的范围更加广泛,如用以证明与鉴别细胞内空泡状的性质,心肌病变及其他心血管疾病的诊断,糖原累积病诊断和研究 ,糖尿病的诊断和研究,用于某些肿瘤的诊断等。除用于糖原的鉴定和黏液的显示外,还可以观察肾小球基底膜、结肠杯状细胞中性黏液物质、阿米巴滋养体和霉菌的着色。为临床诊断、分类和治疗提供了重要的依据。



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