主题:【原创】【我们不一YOUNG】+液相流动相配制注意事项分享

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1、溶剂选择:?所选用的流动相溶剂应具有化学稳定性,?不与固定相和样品组分反应,?且纯度和化学特性应满足色谱过程的稳定性和重复性的要求。?溶剂应不干扰检测器的工作,?选择在测定波长范围内无吸收的流动相?

2、溶剂纯度:?使用HPLC级的溶剂和水,?特别是水相流动相需经常更换,?防止长菌变质。?使用去离子水、?针剂水、?纯净水(炊用)并不合适,?尤其是做梯度洗脱时,?水中的不纯物会成为鬼峰,?从而干扰分析结果?

3、流动相准备:?流动相使用前应用0.45μm滤膜过滤、?脱气,?以清除微粒和灰尘,?并防止在溶剂混合时或压力温度变化时产生大量气泡,?导致泵误动作和输液不畅。?流动相恢复到室温后使用,?特别是水与有机溶剂混合时,?混合液温度变化大,?务必注意?

4pH值控制:?流动相的pH值过高或过低可能造成色谱柱填料被化学破坏。?使用缓冲盐做流动相时,?在使用前和使用后都要用水清洗流路,?绝对禁止将缓冲溶液留在流路中静置过夜或更长时间?

5、含盐流动相:?若需要使用含盐的流动相,?使用前务必过滤,?并且色谱柱需先用低比例有机相的溶液冲洗,?以免缓冲盐析出。?建议现用现配含盐的流动相,?以免流动相因滋生微生物而造成柱填料的污染?

6、温度控制:?校正溶剂的温度至室温,?以确保体积一致和分析的重现性。?这应该通过将溶剂放入热水或冷水浴中来完成,?以适当调节溶剂温度所需的为准?

7、过滤器选择:?在制备过程中过滤流动相时,?选择正确的滤光片类型非常重要。?对于HPLC系统,?建议使用孔径为0.45μm或更小的膜式过滤器。?对于UPLC系统,?孔径应为0.22μm或更小?
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