名称	浓度	用途	来源
全氟三丁胺	纯物质	调谐液，用于核查质量范围和质量分辨率	仪器自带
异辛烷中硬脂酸甲酯	10ng/μL	用于核查质量准确性	坛墨质检科技股份有限公司
异辛烷中八氟萘	100pg/μL	用于核查信噪比、面积重复性、保留时间重复性、谱库检索	坛墨质检科技股份有限公司

四、仪器条件

色谱柱名称：DB-5MS；柱长：60 m；内径：0.25 mm；膜厚：1.0 μm。

升温程序：

1. 用于异辛烷中硬脂酸甲酯，初始温度150℃，保持0min，以10℃/min升温至270℃，保持15min。

2. 用于异辛烷中八氟萘，初始温度60℃，保持0min，以10℃/min升温至220℃，保持2min。

汽化室温度：270℃（用于异辛烷中硬脂酸甲酯）；250℃（用于异辛烷中八氟萘）；载气（氦气）流速：1.0 mL/min；分流比：不分流；进样量：1.0μL。

传输线温度：280℃；离子源：EI（电子轰击离子源）；离子源能量：70 eV；离子源温度：230℃；四极杆温度：150℃。

扫描方式：Scan模式；扫描范围：50 amu～350 amu；溶剂延迟：12min。

五、核查方法及结果数据处理

5.1 质量范围

操作方法：以全氟三丁胺为调谐样品进行调谐，质量设定达到600u以上，观察是否出现质量600u以上(含600u)的质谱峰。

说明：我使用的是自动调谐，调谐时调用的方法是“异辛烷中八氟萘”的方法，我也试过在不同方法条件时进行调谐，调谐结果无差异。

核查结果：从调谐报告中的扫描图中可以看到有大于600u的质谱峰，但是具体值是无法确定的。要查看具体值，在关闭调谐窗口之前，放大扫描图。

5.2 质量分辨率

操作方法：仪器稳定后，执行自动调谐命令或以手动方式进行调谐，直到调谐通过，根据调谐报告结果得到半峰宽W_1/2，以此值作为仪器的质量分辨率。

说明：直接使用5.1的调谐结果即可。

核查结果：从调谐报告的Pw50中选择最大值作为质量分辨率。

5.3 质量准确性

操作方法：按照“异辛烷中硬脂酸甲酯”的仪器条件，待仪器达到稳定之后，注入1.0μL浓度为10ng/μL的异辛烷中硬脂酸甲酯溶液，得到质量色谱图和质谱棒状图。记录m/Z=74u，143u，199u，255u和298u等硬脂酸甲酯5个特征离子的实测质量，以色谱峰中最高点及其前后点代表的三次扫描所得到的质量平均值作为实测质量，有效数值保留到小数点后两位，根据公式(1)计算5个特征离子的实测质量与其理论值(见JJF 1164-2018附录B)之差ΔM，以5个特征离子中绝对值最大的ΔM 作为仪器的质量准确性。

说明：由于我使用的色谱柱与JJF 1164-2018表4中的不同，如果完全按照JJF 1164-2018的仪器条件，无法得到硬脂酸甲酯的色谱峰。考虑到我使用的色谱柱更长，膜更厚，而硬脂酸甲酯的沸点为215℃，因此我提高了进样口温度，延长了柱箱高温段的保持时间，最终在23.2min出峰。条件还可以继续优化以节省检测时间。

数据处理过程：

1. 打开定性分析软件MassHunter Qualitative Analysis 10.0，打开要处理的数据文件，切换到“导航器视图”。

2. 在“方法编辑器”中点选“提取（MS）”，在右边窗口点击“峰质谱图提取（MS）”，选中“平均扫描数”，填写“90”，最后点击“提取峰质谱图”。这样就得到了校准规范中要求的“色谱峰中最高点及其前后点代表的三次扫描所得到的质量平均值”。

3. 在右边“MS质谱图结果”找到硬脂酸甲酯对应的保留时间（在方法开发完成的时候就应该知道了）质谱图，选中它，则在它右边就显示对应的MS峰表（如果没有显示，则要在菜单“视图”中选中）。在MS峰表中找到需要的m/z值并记录下来。这里要注意，默认的m/z值只显示1位小数，要在“质谱图显示选项”中修改为2位。

核查结果：经过简单的数据处理之后就可以得到质量准确性的核查结果，我做的结果是-0.05u，符合要求。

5.4 信噪比、峰面积重复性

注入1.0μL浓度为100pg/μL的异辛烷中八氟萘标准物质溶液，连续6次。采集完成后从总离子流图中提取相应的特征离子（m/z=272），再现质量色谱图。

信噪比计算：读取特征离子峰高（H_s）和基线噪声（H_N），噪声采用峰峰值，在特征离子峰后0.5 min~1 min范围内选取。根据公式（2）计算信噪比β，以6次算术平均值作为信噪比测试结果。

峰面积重复性计算：按色谱峰进行积分，记录峰面积，计算6次峰面积的RSD。

数据处理过程：

1. 打开定性分析软件MassHunter Qualitative Analysis 10.0，打开要处理的数据文件，切换到“导航器视图”。

2. 点击菜单栏“色谱图”——“提取色谱图”，在“提取色谱图”窗口中，左侧选中需要提前色谱图的6个数据文件，类型选择“EIC”，m/z值填272，点击确定。

3. 在“方法编辑器”中选中“计算信噪比”，“信号定义”选择“峰高”，“噪声定义”选择“峰到峰”，点选“特定噪音区域”，输入保留时间后的0.5 min~1 min时间段（我这里的保留时间是14.9min，因此输入15.4-15.9），点击“计算信噪比”。

4. 在“积分峰列表”中就显示了峰面积和SNR（如果没有显示，则在此列表的任意地方点右键，“添加/删除列”，选择要显示的项目），这个列表可以直接导出为一个excel文件，方便后续处理。

5.5 保留时间重复性

注入1.0μL浓度为100pg/μL的异辛烷中八氟萘标准物质溶液，连续3次。采集完成后从总离子流图中提取相应的特征离子（m/z=272），记录其保留时间。按公式（4）计算保留时间重复性Rt。

数据处理过程：

1. 打开定性分析软件MassHunter Qualitative Analysis 10.0，打开要处理的数据文件，切换到“导航器视图”。

2. 点击菜单栏“色谱图”——“提取色谱图”，在“提取色谱图”窗口中，左侧选中需要提前色谱图的3个数据文件，类型选择“EIC”，m/z值填272，点击确定。

5.6 谱库检索

根据质量准确性测试获得的总离子流色谱图，得到硬脂酸甲酯的质谱图，扣除本底后，在谱库内检索，得到硬脂酸甲酯的匹配分数。

数据处理过程：

打开“未知物分析软件”，新建分析——添加样品——方法——编辑——峰检测选择TIC分析——选择谱库——分析全部。

（全文结束）