主题：【原创】-土壤、鱼肉、植物样品中DDT和六六六农药的测定

土壤、鱼肉、植物样品中DDT和六六六农药的测定

1.样品的制备
一、土壤样品：将土壤样品中的树根、石块等杂质除去后，风干后磨碎过40目筛子（0.45mm）。
二、鱼肉样品：将鱼中的骨骼和鱼皮除去，将肉切成小块用冷冻干燥法去水后用研磨粉末。（或者先用组织捣碎机捣碎后再进行干燥）。
三、植物样品：主要包括大米、玉米、植物叶、茎和根。样品风干后用组织捣碎机磨碎后过10～20目筛。

2.提取
用索氏提取：称取10g左右样品和约2g无水硫酸钠混合后置于滤纸筒中，然后分别加入200ng的2,4,5,6-四氯间二甲苯和十氯联苯作为指示物。用150mL正己烷/丙酮混合溶液（体积比为1）提取12小时。提取结束后将提取液用旋转蒸发浓缩为30mL左右（水浴温度40℃，旋转速度不能太快，若有暴沸现象可以加入适量的沸石；旋转蒸发过程需要加入正己烷以除去丙酮。）

若使用超声波提取，可以先将样品用提取液浸泡过夜，然后用分步提取方式进行提取。



3.净化
磺化法净化：将上述的浓缩液转移至分液漏斗中，然后加入3mL的MOS级别浓硫酸，进行磺化，直至硫酸层无色。若在上述过程中，需要进行多次磺化，则每次加入浓硫酸的体积为提取液的10％左右。若在浓缩液中有丙酮存在，则磺化时溶液会变为黑色。磺化结束后，用20％的硫酸钠水溶液洗涤有机相至中性。然后将有机相用无水硫酸钠除水。将有机相用氮气吹扫进行浓缩（氮气应该为柔和，使得液面稍有振动，可以在45℃水浴中进行氮吹浓缩）。浓缩至1mL后，可以用GC－ECD进行分析。

上述样品中，鱼肉、大米和玉米可以不用磺化，用弗罗里硅土柱净化也可。
取层析柱（ф0.8cm×30cm）（预先用丙酮和正己烷淋洗，风干）干法装柱：自下而上依次装入少量的玻璃纤维（用丙酮和正己烷和混合液抽提）、1cm无水硫酸钠、5g降活后的佛罗里硅土和1cm无水硫酸钠，敲实。用20mL的正己烷淋洗，待顶层的硫酸钠即将要接触空气时，加入2mL左右的滤液，用100mL6%的乙醚正己烷混合液淋洗，淋洗液接至具尾茄形瓶中，用旋转浓缩至小体积，再用柔和的氮气吹至1mL。（佛罗里硅土，在650℃条件下烘3小时，冷却至常温加入2%的水降活2小时备用；无水硫酸钠，在450℃条件下烘4小时，冷却至常温，贮于干燥器中备用；乙醚，在30℃条件下加入适量无水硫酸亚铁重蒸。）

4. 测定
气相色谱仪条件（供参考）：进样口温度260℃，无分流进样，进样量1μL。压力10psi，总流量7mL/min.，柱流量1.0mL/min.。吹扫流量3mL/min.，柱箱温度：程序升温，初始温度100℃保持2 min.，以5℃／min的速率升至200℃，不保持，以1℃／min.的速率升至290℃，保持10min.，再以20℃／min.的速率升至300℃；检测器温度320℃，尾吹流量40mL/min.（在分析有机氯农药之前，先用p,p'-DDT测分解率）。DM-5毛细管色谱柱（30m×0.25mm×0.25μm）。
注：上述的柱箱温度是在有十氯联苯替代物的条件下设定的，如果没有加入替代物，可以将升温程序变为更短。

由于p,p'-DDT可能会在气相色谱的进样口分解为p,p'-DDE和p,p'-DDD，因此在用气谱分析有机氯农药时，应先测定p,p'-DDT分解率（本实验每测定12个样品后分别用p,p'-DDT测定一次）。参照美国EPA8081B方法，当两者中任何物质的分解率大于15％时，应该对气谱进样口（包括内衬管和进样垫）进行清洗或者硅烷化，并将毛细管柱连接进样口的一端截去一段。分解率的计算公式如下：