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主题：【求助】这种现象正常吗？

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cherry39
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发表于：2007/07/19 09:50:00 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我用葡聚糖凝胶过滤后，柱子上前后两个色带很明显，中间还有空白色带，可是收集的前面的大分子的色带上毛细管电泳，还是有小分子的色带，这现象正常吗？我是新手，请各位指教！
另外，前面收集的牛血清白蛋白的溶液怎么测它的浓度？文献很多说是用紫外测其吸收，可是我不知道牛血清白蛋白的摩尔吸光系数啊？谁知道啊？在280nm处的。
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lxdongzi2003
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2007/7/19 11:10:00 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你的现象是正常的，因为葡聚糖凝胶柱子的柱效过低造成的。

正常你的毛细管电泳中小分子含量应该很低了。

测前面的牛血清白蛋白浓度，可以用普通的蛋白浓度测定方法：紫外吸收法、凯氏定氮法、Lowry法、考马斯亮蓝染色法，，，
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Last edit by mcds
cherry39
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2007/7/19 12:25:00 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
非常感谢lxdongzi2003！也正如你所说的，电泳上小分子的电泳峰减少许多，我以为可以全部除掉呢。
我正在用紫外测它的浓度。
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biotrandglobal
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2007/7/19 16:07:00 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
蛋白质用紫外吸收法测定浓度的公式很多：
如直接用紫外吸收值与摩尔消光系数相乘，但要求纯度很高才行；
又如用1.45A280nm-0.74A260nm计算蛋白质的浓度。
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