主题:【求助】凝胶色谱作样品,十分疑惑!

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fanlp98
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我用PSS 作标样,分子量分别为1100,3100,6500,14500,31000。目标样品分子量在4000-6000。因为是多聚糖,我先用紫外检测器作,结果我用Agilent1100 作到4200,与其它两个实验室凝胶色谱仪RI做到的5800有很大出入,十分疑惑,柱子是他Tosoh 的SWXL2000,Buffer:10% ACN+0.2M PBS,另我用的是Agilent的GPC软件,而工程师说只能宽标作,先到外面用其它方法测一个分子量的值再作为宽标再作,而Pss 和我的样品因为不是一个种类所以不能直接作窄标(普适因为没有A值K值没法做)。而研究所一位朋友则认为如果排除疏水键的作用,可以直接用PSS 作为标准作一曲线,再运行样品计算结果。当然最好用葡聚糖作标准,但没有那么小分子量。
小弟刚开始做凝胶色谱,向各位凝胶高手求助!本贴对有重大帮助的友人另送分20,没有限制。


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fanlp98
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该帖子于 2009-8-11 21:14:02 被 mcds 删除,删除理由:整理贴子

怎么没人回复,郁闷中!
活到九十 学到一百
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keiai
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fanlp98
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普适法是需要标准和样品a值和k值的,我的流动相是10%乙腈和PBS 溶液,上面所列举的THF 及温度不适用啊。而且这好像也需要样品的a值和k值
fanlp98
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该帖子于 2009-8-11 21:14:02 被 mcds 删除,删除理由:整理贴子

好冷清啊!诸位高手帮忙呀!
麦 兜
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学习
fanlp98
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我用聚苯乙烯作标准品,作为窄标,测样品,直接得分子量结果可以哇?
郁闷的巴乔
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该帖子于 2009-8-11 21:14:02 被 mcds 删除,删除理由:整理贴子

看不到你的图.
tianru的爸爸
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