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主题：【讨论】今天跑一个毒素（软骨藻酸）的液相色谱发现的奇怪现象，流动相乙腈比例降低，紫外吸收降低

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zhouwenhui2000
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发表于：2008/10/31 16:52:59 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
今天做软骨藻酸的液相条件，液相条件大致如下：C18反相柱，流速0.8mL/min,检测波长242nm，流动相为乙腈和含有千分之一的三氟乙酸的水，配比条件待定。发现当乙腈的比例降低时，标准品的紫外吸收的峰高和峰面积明显降低。当乙腈比例从30%依次降低到15%和13%的时候，发现吸收峰面积从2200左右依次降低到1300左右和600左右。
不知道原因何在？
一起讨论一下，大家有没有遇到这个问题？如何解决？
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2008/10/31 18:42:38 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
应该是吸附比较严重
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2008/10/31 20:21:34 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 nnsss 发表:
应该是吸附比较严重

怎么解释呢？按理说，在C18反相柱上，乙腈的比例越高，洗脱能力越强。你是说，乙腈比例降低，软骨藻酸有一部分不能洗脱下来？但是我看有文献，推荐用13%的乙腈，怎么办？
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2008/11/1 14:34:27 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 nnsss 发表:
应该是吸附比较严重

软骨藻酸结构上有两个羧基，而且在乙腈和水（1：9）的混合液中的溶解度较好，怎么可能在水含量高的流动相中容易吸附于C18柱呢？
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