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主题：【求助】请教：疏水层析和反相层析相比对蛋白质吸附能力较弱

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ashao
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发表于：2008/12/10 09:08:33 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
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请教：疏水层析和反相层析相比对蛋白质吸附能力较弱？？

原文大意如下——
疏水等系和反相层析的原理都是利用疏水作用分离蛋白质、多肽的
但是二者使用的介质和流动相有一定的差别
其中疏水层析介质的极性>反相层析介质的极性
所以疏水层析的介质对于蛋白质的吸附能力较弱
    可以使用温和的盐水就可以洗脱
但是反相层级的介质极性较弱
    需要更强的有机溶剂洗脱之

【问题是——蛋白质应该是水溶性的啊？
  应该是和极性更强的疏水层析介质接近
  继而疏水层析介质对蛋白质的吸附能力更强
？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？】
推荐答案：Surly回复于2008/12/10
疏水层析，是根据不同的蛋白与疏水表面产生的相互作用的差异，进行蛋白分离的一种方法。一般而言，离子强度（盐浓度）越高，物质所形成的疏水键越强。影响疏水作用的因素包括：盐浓度，温度，pH，表面活化剂和有机溶剂。疏水层析的应用与离子交换层析的应用刚好互补，因此，可以用于分离离子交换层析很难或不能分离的物质。
在吸附层析中，高极性物质在层析柱上吸附较牢，洗脱时发生拖尾现象和保留时间长的问题。如果在支持物上涂上一层高碳原子的疏水性强的烷烃类，洗脱液用极性强的溶剂，如甲醇和水的混合物。则被分离样品中的极性强的物质不被吸附，最先洗下来，得到较好的分离效果。这种层析法与普通的吸附层析法相反，故称为反相层析。
我觉得这里的蛋白质是指的疏水性蛋白质，蛋白质根据R基团的性质分为疏水性和亲水性，我觉得这两种层析方法应该是用来研究疏水性蛋白质的。
我不是搞生物的，只是发表一点自己的意见，有错误的话请谅解。
补充答案：

It is me!回复于2008/12/10

1楼的说得非常对!!!

疏水是表面的一些个别基团的作用,蛋白质的确是水溶的,因为有很多亲水的氨基酸,但是同样存在疏水的氨基酸,这样就会通疏水柱产生作用了.

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2008/12/10 10:35:02 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
疏水层析，是根据不同的蛋白与疏水表面产生的相互作用的差异，进行蛋白分离的一种方法。一般而言，离子强度（盐浓度）越高，物质所形成的疏水键越强。影响疏水作用的因素包括：盐浓度，温度，pH，表面活化剂和有机溶剂。疏水层析的应用与离子交换层析的应用刚好互补，因此，可以用于分离离子交换层析很难或不能分离的物质。
在吸附层析中，高极性物质在层析柱上吸附较牢，洗脱时发生拖尾现象和保留时间长的问题。如果在支持物上涂上一层高碳原子的疏水性强的烷烃类，洗脱液用极性强的溶剂，如甲醇和水的混合物。则被分离样品中的极性强的物质不被吸附，最先洗下来，得到较好的分离效果。这种层析法与普通的吸附层析法相反，故称为反相层析。
我觉得这里的蛋白质是指的疏水性蛋白质，蛋白质根据R基团的性质分为疏水性和亲水性，我觉得这两种层析方法应该是用来研究疏水性蛋白质的。
我不是搞生物的，只是发表一点自己的意见，有错误的话请谅解。
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It is me!
hmzhou83
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2008/12/10 14:07:15 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
1楼的说得非常对!!!

疏水是表面的一些个别基团的作用,蛋白质的确是水溶的,因为有很多亲水的氨基酸,但是同样存在疏水的氨基酸,这样就会通疏水柱产生作用了.
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ashao
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2008/12/12 12:13:27 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
也同意一楼的说法
不过看来原文ms不是很严谨
或者偶的理解不到位，呵呵
谢谢指教
结贴的时候金币
原文由 jusiting 发表:
疏水层析，是根据不同的蛋白与疏水表面产生的相互作用的差异，进行蛋白分离的一种方法。一般而言，离子强度（盐浓度）越高，物质所形成的疏水键越强。影响疏水作用的因素包括：盐浓度，温度，pH，表面活化剂和有机溶剂。疏水层析的应用与离子交换层析的应用刚好互补，因此，可以用于分离离子交换层析很难或不能分离的物质。
在吸附层析中，高极性物质在层析柱上吸附较牢，洗脱时发生拖尾现象和保留时间长的问题。如果在支持物上涂上一层高碳原子的疏水性强的烷烃类，洗脱液用极性强的溶剂，如甲醇和水的混合物。则被分离样品中的极性强的物质不被吸附，最先洗下来，得到较好的分离效果。这种层析法与普通的吸附层析法相反，故称为反相层析。
我觉得这里的蛋白质是指的疏水性蛋白质，蛋白质根据R基团的性质分为疏水性和亲水性，我觉得这两种层析方法应该是用来研究疏水性蛋白质的。
我不是搞生物的，只是发表一点自己的意见，有错误的话请谅解。
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