双折射体在正交情况下,旋转栽物台时,双折射体的象在360°的旋转中有四次明暗变化,每隔90°变暗一次。变暗的位置是双折射体的两个振动方向与两个偏振镜的振动方向相一致的位置,称为“消光位置”从消光位置旋转45°,被检物体变为最亮,这就是“对角位置”,这是因为偏离45°时,偏振光到达该物体时,分解出部分光线可以通过检偏镜,故而明亮。根据上述基本原理,利用偏光显微术就可能判断各向同性(单折射体)和各向异性(双折射体)物质。
(五)干涉色:在正交检偏位情况下,用各种不同波长的混合光线为光源观察双折射体,在旋转载物台时,视场中不仅出现最亮的对角位置,而且还会看到颜色。出现颜色的原因,主要是由干涉色而造成(当然也能被检物体本身并非无色透明)。干涉色的分布特点决定于双折射体的种类和它的厚度,是由于相应推迟对不同颜色光的波长的依赖关系,如果被检物体的某个区域的推迟和另一区域的推迟不同,则透过检偏镜光的颜色也就不同。
三、偏光显微镜在装置上的某些要求
(一)光源:最好采用单色光,因光的速度、折射率、吸收和干涉现象由于波长的不同而有差异。一般镜检可使用普通光。
(二)载物台:为圆形,要用可以调节中心且边缘刻有角度(360°)能旋转的载物台。
(三)和镜:应使用无应消色差物镜,因复消色差和半复消色差物镜本身常发生偏振光。
(四)目镜:要带有十字线镜。
(五)聚光镜:为了取得平行偏光,应使用能推出上透镜的摇出式聚光镜。
(六)补偿片:作精细偏光镜检时,尚需利用补偿片,有石膏、云母及石英补偿片等。
四、偏光镜检术的要求
(一)光轴与载物台通光中心必须在一直线上,否则旋转物台时,被检物体就偏离视场中心,甚至移到视场之外,而影响镜检。
(二)起偏镜和检偏镜均标有振动方向的符号,当处于正交状态时,习惯上通常使起偏镜的振动方向与目镜内十字线的横线一致,而检偏镜的振动方向与十字线的给纵线一致。
(三)制片不宜过薄,否则微弱的双折射性就易消失。同时应先以新鲜状态进行观察(不然常由于固定、染色等步骤的处理,而使双折射性加强或消失),然后再对照进行观察。