实战宝典 原创大赛 仪器问答 仪友会 总帖：8081427今日发帖：7 我的社区 签到
快速导航 采购仪器 提醒
液相色谱（LC）
版主:
入住本版
专家:
居民列表

主题：【求助】求助：调整流动相的比例相关问题！

浏览0 回复11 电梯直达
conferen
头像
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
发表于：2010/03/27 09:12:23 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
求助高人，前段时间建立了HPLC测定阿替洛尔的色谱条件，甲醇和磷酸水为流动相，保留时间约为8min；过了段时间后，该条件就不能重复了。而且无论怎么调整流动相的比例和极性，阿替洛尔都在2.5min出峰，现已经证明不是色谱柱问题，也不是检测器问题，所用溶剂也没问题。这下不晓得该咋个办啦？还望高人指点迷津。
为您推荐
近期热榜
热门活动
您可能想找: 气相色谱仪(GC) 询底价
选参数 看心得 找厂商 查方案
专属顾问快速对接
立即提交
可能感兴趣
小丶风
yujianlin
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2010/3/27 9:47:26 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
时间变化这么大？
你怎么就肯定2.5min出峰的那个就是你要检测的物质？
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
xyhdcm2010
xyhdcm2010
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2010/3/27 12:00:04 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
2.5min太快了吧!!要把它往后延才好!!
赞贴
1
收藏
0
拍砖
0
举报
有水有渝
xky0230699
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2010/3/27 15:00:39 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
两次肯定有一次做的有问题，很确定一下到底哪次做的出来的峰才是对的，第一次的未必正确，换台仪器，与其它文献比较，看看哪个才是合理的。流动相的组成是什么样的。

药典里已有标准方法，为什么要自己再建立？

赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
2010/3/27 15:04:03 Last edit by xky0230699
conferen
conferen
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2010/3/27 15:58:32 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
流速应该是没有问题，因为测试了同时在研究的其他药物，色谱行为正常。
换了柱子试过，还是一样的问题。

随着样品浓度的不同，峰面积不一样啊。而空白也没用这个峰。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
冷冷的冰雨
xy4585618
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2010/3/27 16:07:35 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
其他药物色谱行为正常，请问流动相比例一样吗？要是不一样，可以肯定的说，是水相的比例非人为的发生变化！
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
liushaobo710609
liushaobo710609
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2010/3/27 21:16:31 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如果你这个问题一直是这样，包括更换柱子后，过一段时间你的出峰时间有提前。我猜可能是你的柱子上的固定相和你的样品中一些物质发生反应，到了一定程度时候，柱子性质发生变化，所以保留时间发生变化了！
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
zuoqiuyelin
zuoqiuyelin
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2010/3/27 21:54:21 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
用新配的流动相做做，有的时候流动相用久了估计会出问题的
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
miss_fairy
miss_fairy
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2010/3/28 1:56:12 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
会不会是稳定性的问题。每次都是新制的样品溶液吗？
2.5min会不会是杂质峰，或是分解产物的峰？
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
conferen
conferen
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2010/3/28 10:56:50 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 欧冠+世界杯(xky0230699) 发表:
两次肯定有一次做的有问题，很确定一下到底哪次做的出来的峰才是对的，第一次的未必正确，换台仪器，与其它文献比较，看看哪个才是合理的。流动相的组成是什么样的。

药典里已有标准方法，为什么要自己再建立？



因为之前做了一个星期的液相，对测定方法做了方法学验证的。所以觉得第一次的应该是没有问题的，而且现在调节流动相的比例，保留时间不移动。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
conferen
conferen
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2010/3/28 19:35:51 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
感谢楼上各位朋友的意见。为了节约时间，就在这里一并解释了。
1、用以前的储备液和新配的溶液进样，结果一样；
2、流动相比例未改变，厂家也未改变，采用新配制流动相反复实验，都是一样的2.5min出峰；
3、如果是药物与色谱柱之间发生反应，导致柱子性能改变，那么更换新柱子应该也要用一段时间才 会出现这种问题，但我拿新柱子一试，结果和旧柱子完全一样；

4、我猜测会不会是药物本身已经发生了很大的改变，变成了完全不保留的物质。想在药店买阿替洛尔的片剂来验证一下，但这几天找了附近大大小小的药店，始终没找到。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
手机版： 【求助】求助：调整流动相的比例相关问题！
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
头像
高级回复 发表评论
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁