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主题：【讨论】关于有手性碳物质的检测

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有水有渝
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发表于：2010/04/23 09:31:59 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如果分析一个有手性碳的物质，使用反相色谱柱，在不加入手性拆分试剂的情况下，使用缓冲盐和有机相为流动相，有没有可能分开这一对映体？在检测过程中出现在有机相比例较低的情况下，理论上是一个物质的，却出来两个峰，这两个峰的分离度很差，只能看到峰尖处有分开。
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2010/4/23 10:54:04 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
看到过，儿茶素和表儿茶素好像是没用手性色谱柱或手性流动相，但是不多。
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pandora98
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2010/4/23 12:46:36 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
理论上没有手性柱或手性流动相，是不可能把手性分子的两种构型在普通C18柱子上分离开，但是如果有两个手性中心，其中的非手性对映异构体是能够分离开的，而手性对映异构还是不能分离。
你说的情况像是主峰分叉，有可能是因为稀释剂比流动相极性小。
该帖子作者被版主 xky0230699加 2积分， 2经验，加分理由：提供知识点
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有水有渝
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2010/4/23 13:00:46 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我的样品是直接使用缓冲盐溶解的，没有加入有机相。
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2010/4/23 15:57:35 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
我的样品是直接使用缓冲盐溶解的，没有加入有机相。

那就试试降低样品浓度和进样量，一直到一个很小的值，如果还是一直分叉，那就不是稀释剂和样品浓度的问题。
如果是异构体的分离，在样品峰变小时分离度会增加，很小的时候有可能达到完全分离。
如果降低样品浓度使样品峰变成单峰，则说明不是手性分离
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有水有渝
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2010/4/23 20:50:43 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
虽然没有把样品稀释到最小，但也不大了，峰高只有300mv，这个不高呀，基本可以用于含量测定的峰高。
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pandora98
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2010/4/24 12:38:32 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
虽然没有把样品稀释到最小，但也不大了，峰高只有300mv，这个不高呀，基本可以用于含量测定的峰高。

我的意思是你把样品稀释到定量限水平，这样可以排除样品峰分叉的可能
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有水有渝
xky0230699
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2010/4/24 19:54:28 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
明白，有空做一个看看，谢谢pandora98专家
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