单一种类重金属对Vibrio fischeri的毒性抑制作用

生命存在的意义多种多样，地球上各种生命的存在对于人类来说，其作用也各不相同。除了维持生物多样性外，很多生物还为我们带来了各种各样的便利和好处，比如猪的生命是给人类提供了美味的食物，一些益虫的生命存在为人类制衡了病虫害，实验用小鼠的生命为人类探索生命的奥秘做出了巨大贡献……同样，费氏弧菌的生命在人类手中，转变为了探测污染物对生物伤害的利器。

1.费氏弧菌（Vibrio fischeri）生物毒性测试实验原理

理化和生物有毒物质会影响发光菌的呼吸作用、电子传输系统、ATP 产生、蛋白质或脂类合成，从而改变发光强度。发光菌急性毒性测试系统就是利用此原理对水样的生物毒性进行测试。

2实验部分

2.1 测定条件

美国SDI公司DeltaTox毒性检测系统要求的环境温度为10℃～28℃，同一批样品在测定过程中温度波动不超过1℃

2.2试剂准备

取出储存在-20 ℃下的冻干细菌，立即加入1.5 ml稀释液让细菌水合；

2.3 水样预处理

由于本次试验为水溶液，其他环境非毒性因素干扰较小，故而无需预处理。

2.4抑制发光率测试

2.4.1加010 mlMicroTox渗透调节液（22％NaC1溶液）于1.0 ml样品中调渗透压；

2.4.2准备样品的1个稀释系列，把1.0ml稀释液(参考)和1.0ml样品加入测试小管（A1、A2）中；

2.4.3将水合的细菌溶液各取0.50ml加入另外两个测试小管（B1、B2），等待15 min；

2.4.4开机后将水合的细菌溶液（B1、B2）按顺序放入仪器，读数结果为零时间读数。

2.4.5各取0.50ml参考样和样品（A1、A2）分别加到中（B1、B2）两个测试小管，5 min到计时后，按顺序读取抑制发光率(％)。

3结果与分析

3.1重金属对细菌发光率的影响

3.1.1 单一金属的毒性

上述试验结果显示，当污染物质量浓度，Cu≥2.5mg·L-1，Cd≥0.4 mg·L-1，Pb≥3 mg·L-1， Cr≥30 mg·L-1时，As≥2 mg·L-1发光菌的抑制率为100%。当低于这些质量浓度时，随着毒物剂量的不断增加，发光菌的相对发光率不断降低，说明毒性强度与污染物质量浓度呈正相关．发光菌的相对发光率与污染物的质量浓度呈正相关，其相关系数0.922～0．990，P值显著水平<0．01．这五种物质毒性强度也不相同，毒性强弱为 Cd＞ As＞Cu＞Pb＞Cr，各物质毒性效应回归方程及EC50见表5。

☆注：表中r表示发光菌的抑制率与污染物的质量浓度相关系数

由于以上几种重金属在突发性环境监测中较为常见，所以当发生以上单一污染物污染事件时，我们可以用表5的回归方程估算出污染物浓度，从而在知道污染程度的同时也估算出污染物的环境泄露总量。

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主题：【第六届原创】单一种类重金属对Vibrio fischeri的毒性抑制作用