原文由 wslmpol(wslmpol) 发表:
根据你的实验描述,误差来源有两个:标准品和样品的称量误差;内标溶液的移液误差
1. 称量误差:你用是万分之一天平,也就是精确至0.1mg。那么称取10mg可能产生?0.5mg的误差;想降低称量误差有两个办法:使用更精密的天平或增加称样量。
2. 移液误差:一般情况,移取1ml液体的误差水平在1%左右。解决办法:用称量代替移液,即对照样和样品都用天平称移入的内标重量,用这个重量计算加入的内标物质量。另外,你用峰面积法来计算移液的RSD是不准确的,因为HPLC进样的RSD你没考虑。
至于定容误差,在内标法里可以忽略不计。
以上为个人经验,不一定准确。
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
同意楼上的意见,容量误差可以通过检定解决,称液操作误差只能通过增加熟练度与准确度解决。
原文由 qqqid(qqqid) 发表:
楼主2%的误差都不能接受,这实验是没法做的。
每一件量器都有设计误差,移液管误差大约1%,容量瓶定容误差大约1%,万分之一天平0.1mg。
具体到楼主的实验,标准品纯度未知,称量标准品误差1%,定容误差1%,移液误差1%,再定容误差1%,最基本的步骤,还没上仪器误差就已经超2%了。
原文由 你一见我就笑2169(v2650137) 发表:
关于操作这块有没有什么好的办法来衡量?
我一直做QC工作前后6年时间,之前单位也经常做含量测试,个人感觉操作应该还算规范,不过确实没有专业的考核过,有好的办法确实有必要自查一下。之前的公司含量测试要求两个平行样品的结果的极差不超过0.60%,平时做样时基本上都可以达到,所以就没怀疑过这个原因。
我不明白的是以前公司使用的是安捷伦的1290(DAD检测器)和1120(UV),含量测试时主峰峰面积基本上在几千万的样子(纵坐标单位是mAU),峰高一般约为80;现在的公司使用的是安捷伦1260(DAD检测器),含量测试时主峰峰面积基本上在7500的样子(纵坐标单位是mAU),峰高一般约为250.
尽管待测物质不一致,但峰高都不高的情况下,面积竟然差了4个数量级,不知道这个是什么原因造成的?
原文由 wslmpol(wslmpol) 发表:是的 关于这个峰面积的问题我还在上家公司专门拍过照片的,1200万左右 峰高确实只有80左右。以前一直觉得很正常,现如今在新公司,发现峰高250左右,峰面积却只有7500左右,很是不解。(也许是因为物质不同、色谱条件不同造成的差异?)
个人认为操作要注意两块:重现性和准确性。重现性比方说用移液管移液,每次的操作方式必须一致,不能一次靠壁下一次不靠壁。准确性则需要累积经验,哪种实验操作方式方式能得出更准确的数据。
色谱内标法的RSD是可以达到千分位水平的。
峰高80面积几千万这个不太可能吧?一般来说风只要峰形相差不大,面积和峰高是成正比的。