主题：【第十二届原创】利用SPE-HPLC/MS技术检测鸡肉中利巴韦林的含量

利用SPE-HPLC/MS技术检测鸡肉中利巴韦林的含量

      利巴韦林是一种合成的核苷类抗病毒药，是一种前体药物，当微生物遗传载体类似于嘌呤RNA的核苷酸时，它会干扰病毒复制所需的RNA的代谢，抑制病毒的RNA和DNA合成。体外细胞培养试验表明，利巴韦林对呼吸道合胞病毒（RSV）具有选择性抑制作用。无论是基层社区医院还是三级医院，无论是综合医院还是儿童专科医院，无论是普通感冒还是轮状病毒肠炎，还是普通型手足口病，都可能被开利巴韦林。虽然利巴韦林的体外试验对呼吸道合胞病毒具有选择性抑制作用，但其治疗腺病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒或流感病毒感染临床效果目前并不确定。国外只有北美国家对于极少数重症呼吸道合胞病毒肺炎才偶尔应用。
      抗病毒药物在动物源食品中乱用的现象层出迭起，各类抗病毒药物标准品为有效的抗病毒药物的质量掌握和有害残留检测提供主要作用。本文以鸡肉中的抗病毒药物(利巴韦林)作为研究对象，创立而且优化了鸡肉中残留药物的高效液相色谱-质谱分析方法,
      使用200 mg的3mL HyperCarb 固相萃取柱，取2 g鸡肉，加入15mL水，涡旋混匀，超声提取10 min，6000 rpm离心10 min，取3 mL上清液进行固相萃取。
SPE柱净化分析物过程：
活化：1 mL乙腈，1mL甲醇。
上样：3 mL上清液用1mL/min流速上样。
洗脱：500 mL 20%乙腈-水溶液，洗脱两次，合并洗脱液，直接进样。
分析方法采用HPLC-MS/MS方法。流动相选择A：水溶液（5mM乙酸铵），B：乙腈。梯度洗脱程序：0-1min，90%A；1-2min，90%-40%A；2-5min，40%A；5-6min，40-90%；6-8min，90%A。流速：0.2 mL/min。柱温：25 ℃。进样量：10 mL。MS条件：电喷雾电离源（HESI），正离子模式选择反应监控（SRM）扫描模式。喷雾电压：3700V，毛细管温度：350℃。
离子对参数：利巴韦林：245.1→96.2，245.1→113.2，碰撞能量：43V，14V，透镜电压：80V，80V；利巴韦林同位素内标：249.9→95.9，249.9→112.9，碰撞能量：43V，14V透镜电压：64V，64V；
结果：鸡肉空白添加1 ppb的利巴韦林和同位素的HPLC-MS/MS图。见下图。添加50 ppb的加样回收率为121.8%，重现性良好。