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主题：【已应助】做氨基酸实验做不出来

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Ins_31e6b343
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发表于：2021/10/12 12:38:40 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
谁能救救孩子，毕业论文实验一直做不出来，不知道咋回事，测鸡肉17种氨基酸，一直第五分钟左右就没峰了，而且乱七八糟的
推荐答案：omjia回复于2021/10/12
不论是饲料还是食品中氨基酸，标准方法都是要求使用氨基酸自动分析仪，我们实验室是使用biochrom 30，分析的就很好。如果是用液相分析，楼主要摸索好程序升温条件，我们氨基酸分析仪的程序升温就很复杂。
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dahua1981
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2021/10/12 14:13:28 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
感觉应该是前处理也存在问题，氨基酸是需要柱后衍生的，不知道楼主怎么操作的？
附件：
高效液相色谱柱后衍生法测定鸡肉中的18种氨基酸_金明.pdf
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2021/10/12 14:16:20 Last edit by dahua1981
omjia
liqunqueen
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2021/10/12 14:50:57 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不论是饲料还是食品中氨基酸，标准方法都是要求使用氨基酸自动分析仪，我们实验室是使用biochrom 30，分析的就很好。如果是用液相分析，楼主要摸索好程序升温条件，我们氨基酸分析仪的程序升温就很复杂。
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Ins_31e6b343
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2021/10/12 18:07:00 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我是先将样品烘干粉碎过50目的筛子，然后加盐酸充氮气，密封110℃水解24小时，然后将ph调到中性左右，再加衍生剂衍生，然后再过滤到进样瓶里面（我们用的新的柱子，洗柱子先用的甲醇，后用流动相洗的）流动相A是醋酸盐－磷酸盐缓冲液，流动相B是60％的乙腈
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2021/10/12 18:15:37 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 dahua1981(dahua1981) 发表:感觉应该是前处理也存在问题，氨基酸是需要柱后衍生的，不知道楼主怎么操作的？
我是先将样品烘干粉碎过50目的筛子，然后加盐酸充氮气，密封110°C水解24小时，然后将ph调到中性左右，再加衍生剂衍生，然后再过滤到进样瓶里面(我们用的新的柱子，洗柱子先用的甲醇，后用流动相洗的)流动相A是醋酸盐一磷酸盐缓冲液，流动相B是60%的乙腈
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安平
byron1111
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2021/10/12 20:53:17 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
          这个分析，衍生的问题比较多，也非常重要。

          建议排除一下衍生试剂，或者衍生条件控制的问题为好。


          其次考察色谱柱。
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omjia
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2021/10/13 16:48:02 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
看你的分析是用柱前衍生，我们设备是柱后衍生，是氨基酸先经柱子分离，然后和茚三酮显色，经检测器测定。
楼主在做实验前需要先调研方法的可行性，比如液相法测定氨基酸的文献支持。参看文献的方法摸索。
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lijing320323
lijing320323
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2021/10/13 19:48:15 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
咨询工程师
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valorb
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2021/10/13 23:23:38 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一般衍生化再测比较好
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dadgoh
dadgoh
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2021/10/14 6:45:54 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
标样正常吗
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maniac
Insm_5d2a2212
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2021/10/20 21:19:10 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你是用柱前衍生进样测试吗？建议你用蒸发光检测试试，直接进样测试17种氨基酸分离毫无压力。
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