主题:【分享】【金秋计划】“杜氏小管产气”试验

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一、杜氏小管产气试验和糖发酵试验

杜氏小管,一种玻璃小导管。一端封闭,另一端开口,可以插入到试管中。

这两个试验中都需要用到杜氏小管,也都是为了观察产气情况。但糖发酵试验中同时还要加入指示剂观察产酸情况。操作上类似。

二、试验原理

杜氏小管产气试验目的在于检测某些微生物在代谢过程中是否产生气体,气体摸不着看不清,产气量又微弱,在试验中通过在试验试管中放置一个倒置的杜氏小管,微生物一旦产气,气体便会收集到杜氏小管中,就可以直观地观察到微生物(尤其是细菌)是否产气以及产气的量。

三、操作步骤

1.菌种活化

选择合适的培养基活化菌种。

2.培养基制备

配制培养基,分装到合适的试管中,编号,灭菌。

3.接种

待冷却后,用接种环挑取活化好的菌种或菌液转移至试管培养基中,混匀,对照组不接种。

4.放置杜氏小管

首先,用无菌医用注射器吸取培养液,针头朝上排空其中空气,然后将针头伸到杜氏小管底部,慢慢将培养液推入杜氏小管内直到液面凸起,再至过量以至培养液润湿杜氏小管外表。

或者将试管内壁湿润后,用镊子夹起杜氏小管,轻轻放置在试管内壁,让其自动慢慢滑入试管底部。如果不行,可以助推。盖上试管盖。
5.孵育培养

将准备好的试管放置于适宜的恒温培养箱中培养。
6.观察记录

培养结束后,观察杜氏小管内是否有气泡产生。如果有气泡产生,则记录为“+”;如果没有气泡,则记录为“-”。

四、注意事项

1.杜氏小管放置时间

在有关教材中,培养基灭菌前将杜氏小管放入试管中,跟试管一起灭菌。这种方法既不容易染菌也方便操作。但这种方法特别容易有气泡,影响试验结果。

本试验采用杜氏小管跟培养基一起灭菌,接种后将杜氏小管放入试管中,基本不会因为气泡影响实验结果。

2.无菌操作

实验过程中,严格按照无菌操作技术进行。

3.培养条件

这里主要指温度,当然也要考虑湿度、光照等培养条件。这些需要根据微生物种类严格控制,以免影响实验结果。

4.观察记录

在培养之前要观察杜氏小管内是否有气泡,如果有气泡,重新放置杜氏小管,或重新做实验。如果没有气泡再进行培养。
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