主题：【分享】【金秋计划】药敏试验之E-试验

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发表于：2024/09/06 22:12:59 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

E-试验（E-test）跟纸片扩散法和稀释法一样，也是药敏试验之一。E-试验是结合了纸片扩散法和琼脂稀释法的原理和特点，是一种抗生素浓度梯度稀释法直接测量MIC的药敏试验的体外药敏试验方法。

一、E-试验原理E-试验要用到E-试条，它是一条带有抗生素浓度梯度的塑料条。该条带表面涂有抗生素，浓度从条带一端的沿条带逐渐降低，形成连续的对数浓度梯度。将E试条放置于已接种有待测细菌的琼脂培养基上，经孵育后，可见一个以试条为中心的对称抑菌椭圆环，椭圆环边缘与试条交界处的刻度即为MIC值。
二、E-试验操作步骤前面几个步骤跟纸片扩散法一样。

1.菌液制备

采用划线法将大肠杆菌受试菌种和标准菌种接种于营养琼脂平板，35℃培养16-18h，然后挑取单菌落，重悬于3mL无菌生理盐水中，混匀后与标准比浊管比浊。调整浊度与标准比浊管0.5麦氏相同。

2.倒平板将MH琼脂培养基溶化后倒平板，注意平皿中培养基厚度均匀，倒3套平板。90mm×15mm，平板厚度均匀，约4mm厚，大约1/3高度。

3.涂平板

用无菌棉棒蘸取菌液（金黄色葡萄球菌）。将多余菌液在液面上方管壁内轻轻旋转挤出，涂布在MH琼脂平板整个平面三次，每次旋转60度，最后沿周边绕两圈，保证涂均匀，平板加盖室温干燥5min。

4.插入E试条

用无菌镊夹取试纸条柄端，将其垂直插入MH培养基，并确保E试条与培养基间无气泡。E试条抗菌药物面（通常标有浓度刻度）朝上，抗生素浓度高的一侧（有标记）靠培养皿。

E试条有垂直插入和平放两种，一般建议垂直插入方式。

5.孵育

将上述平板倒置于37℃恒温培养箱中培养，观察并记录抑菌圈大小。
6.结果分析孵育后围绕着E试条可形成一个椭圆形的抑菌圈，抑菌圈与试条的横向相交处的读数刻度为 MIC值。

三、E-试验与纸片扩散法和稀释法的异同1.E试验、纸片扩散法和稀释法都是常用的药敏试验，都可以用来选择抗菌药物。

2.E试验和纸片扩散法：操作相似，但E试验更简便，可以直接读取MIC值，相比，纸片扩散法比较繁琐，需要测量抑菌圈的大小。

E试验和稀释法：虽操作上有差异，都可以确定MIC值，但E试条是带有抗生素浓度梯度的塑料条带，在琼脂平板上形成连续的浓度梯度，相比，稀释法比较繁琐，需要连续对倍稀释形成递减的抗生素浓度梯度。
注意事项

1.E试条接触琼脂后，不能移动位置，以免影响抗菌药物在琼脂中的扩散和形成的浓度梯度。

2.E试条需要按照说明书要求进行保存。3.E试条需要正规机构购买。4.平板中E试条的个数要根据平板大小，比如说90cm平板可以插入两条，150cm可以插入6条等。

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