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主题：【第六届原创】超滤膜包的选择

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green_tee
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发表于：2012/08/23 16:14:35 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
维权声明：本文为green_tee原创作品，本作者与仪器信息网是该作品合法使用者，该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为，我们将追究法律责任。

                      超滤膜包的选择

在选择超滤膜包上，大家往往存在一个误区，比如目标蛋白为100kD的蛋白要做浓缩，就以为要选择100kD的膜。殊不知，膜并不是一个刚性的筛子，并不是标定100kD的膜包，就表示所有大于100kD的蛋白就全部被截留，小于100kD的蛋白就全部被透过。

膜孔径的大小，是按照其所截留的葡聚糖大小来定的。举个例子，如果一个膜对100kD的葡聚糖的截留率达到90%，那就定义这个膜是100kD。有人会说，这样的截留率也是可以接受的呀。让我们仔细考虑一下，切向流超滤系统是一个不断循环的过程，循环1次是90%，循环2次是90%×90%=81%，循环3次是90%×90%×90%=72.9%，循环4次……由此可以预见，循环的次数越多，损失的样品就越多。如果要提高截留率，使用的膜包孔径就要比目标物小，通常要使截留率在99%以上的话，选择的孔径要比目标物小3-5倍。反之，如果是澄清过滤，即让目标物透过膜，就要选择比目标物大3-5倍的膜包。

除了孔径的选择，我们还要考虑膜包的材质。孔径在1kD-1000kD的超滤膜包，材质有两种：聚醚砜和再生纤维素；孔径在1μm以上的微滤膜包，材质为PVDF。聚醚砜材质蛋白吸附低，耐强酸强碱（pH1-14）,不耐受有机溶剂；再生纤维素蛋白吸附极低，耐受有机溶剂，不耐受强酸强碱（pH2-13）。需要根据料液性质、清洗条件、蛋白浓度及产品附加值等多重条件选择合适的膜包。

大家在选择膜包时，尽可能选择二代及二代以上的无缺陷膜包。因为一代膜包的过滤层薄，支撑层结构单薄不致密，在停泵出现反压时，很容易冲破过滤层，造成膜的损坏。尤其要提到的是，如果在工艺中既需要耐受有机溶剂，又需要用强酸强碱清洗，可以选择三代复合再生纤维素材质的膜包。


在选择膜面积的时候，通常处理量在15-1000ml的可以选择50平方厘米膜包，100ml至10L，可以选择0.1平米膜包，2L或更大，可以选择0.5平米膜包。具体选哪种要根据所需处理时间及料液情况而定。

希望以上的这些经验之谈能对大家有所帮助。
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nancy-lxj
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2012/8/24 12:01:44 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
看着挺专业。
不过超滤这个方法目前用的不多，尤其是膜包，不算太熟悉，顶多用点小量的超滤管。
能否再介绍点具体经验？什么时候用？小量样品是否没必要用膜包？
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2012/8/27 6:37:33 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
很好的分！
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yuduoling
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2012/8/29 7:33:49 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
在越滤膜包的选择上，的确有不少小窍门
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green_tee
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2012/8/30 16:50:19 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
超滤膜包的使用其实是很广泛的，只不过我们在实验室接触多的，都只是上游构建载体后，小量表达蛋白，做做western之类，这时通常只有几毫升的处理量。但对于通过发酵或者生物反应器来表达蛋白的童鞋或老师来说，那量就有几百升甚至几十升，对于那些有规模的药厂，都有上千升的，那就不是超滤离心管能解决的了。

通常20ml以上，就可以使用超滤系统，压力、流速这些参数可以线性放大到中试及生产级别，对于那些药厂的研发，或者与企业有合作，再或者实验室想自己生产放大的，这些参数都是非常重要的。
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ziyouabc
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2013/9/24 14:53:51 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
最近正在烦恼这个问题，看到你的帖子非常受益，谢谢啦。
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ziyouabc
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2013/9/24 14:54:30 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
真好，真心感谢
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