实战宝典 原创大赛 仪器问答 仪友会 总帖：8110297今日发帖：1 我的社区 签到
快速导航 采购仪器 提醒
液相色谱（LC）
版主:
入住本版
专家:
居民列表

主题：【求助】求高手帮忙！十万火急！

浏览0 回复10 电梯直达
madong5758
头像
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
发表于：2007/10/15 22:32:00 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我用的柱子：TSK-GEL SW Type    Steel Column SWXL 7.8x30(cm x cm)样品：0.3g/L蛋白质溶液(检测其中蛋白质是否聚合）
缓冲液：PH6.8的0.2M左右的磷酸盐缓冲液（浓度是否太高？）
清洗液：10%的甲醇水溶液
流速：0.8ml/min
最开始用的时候没加保护柱，压力大约41巴。后来加上保护柱后压力大约46巴，进样大约100次后，今天发现压力突然增大了达到63巴，柱子压力的上限为70巴。
我每次做完实验都用10%甲醇冲柱子半小时，再用水冲半小时。再拆柱子。
我不知道是什么原因造成柱子压力突然增大，求高人指点，怎么才能使柱子压力降下来？用什么洗液冲洗柱子？还有柱子能不能反向冲？
为您推荐
近期热榜
热门活动
您可能想找: 气相色谱仪(GC) 询底价
选参数 看心得 找厂商 查方案
专属顾问快速对接
立即提交
可能感兴趣
意境
junyuxinyan
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2007/10/15 22:52:00 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
具体原因不知道，应该是某个地方堵了，包含那个滤芯。柱子是可以反冲，你应该反冲一下，我曾经作过一次蛋白质检测，不过当初冲柱子好像不是10%甲醇，是纯的甲醇，个人看法，达人赶快出现帮忙解决问题
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
Easy-Boy
easyboy
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2007/10/16 8:37:00 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你不能将柱子保存在100％的水中，而应当在拆柱子前用80％甲醇冲洗柱子。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
wsy18
wsy18
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2007/10/16 9:18:00 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
清洗再生柱子的方法，供参考：
[flash]http://files.instrument.com.cn/bbs/upfile/200718122023.swf[/flash]

点击下部俩小叶片可观看下一页或返回，点击刷新按钮可返回首页。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
xiaomity
xiaomity
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2007/10/16 9:21:00 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
磷酸盐浓度也就20mmol左右才是可用的.做蛋白不加保护柱会很快被残留蛋白给堵塞.在其他方法都搞不定时,可以用HPLC级THF冲洗30分钟(1ml/min),再用甲醇或乙腈冲洗30分钟,再降速到0.2ml/min分钟冲洗30分钟
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
xiaomity
xiaomity
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2007/10/16 9:33:00 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
上面都是C18柱的清洗,凝胶柱估计得用5%甲醇低流速(0.2ml/min)冲洗过夜.换根保护柱.
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
wsy18
wsy18
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2007/10/16 10:38:00 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
关于蛋白质凝胶柱的清洗再生在三楼flash课件的第五节中有介绍，有二种情况，方法是不同的，可以参考。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
Last edit by wsy18
zap_1979
zap_1979
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2007/10/16 13:28:00 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊

你好!
你使用的缓冲溶液盐浓度不算很高,但在你做完之后没有清洗好管路,泵以及柱子等方面.
建议你现在先用低流量,60%水+40%甲醇或者乙腈送开主动阀,把纯水放在你之前放缓冲溶液的瓶子中,冲洗整个管路,看压力,如果压力过高,可能要换主动阀芯之类的东西,如果没问题,冲一段时间后,低流量冲洗柱子,等压力正常之后,再20%左右的异丙醇冲洗管路，可以用剃度洗脱程序变化冲洗,一端时间后可能会正常,再用60%水+40%甲醇或者乙腈冲洗.
估计是你做后没有好好冲洗,谢谢,希望对你有帮助!
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
mars_0529
mars_0529
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2007/10/16 13:29:00 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
什么型号的液相？？
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
madong5758
madong5758
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2007/10/16 16:29:00 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊

哇！这么多的高手，看来来对地方了，谢谢各位老师啊。
昨天采取的措施：
1、我先把色谱仪的滤芯（比较脏了）换了，压力降了大约4巴。
2、用超纯水0.2ml/min反向冲了3个小时，在柱前头冲出来个小米粒大小，塑料材质，灰白色的颗粒，不知道是不是柱子里的东西。
3、我又正接柱子用10%的甲醇0.2ml/min冲了20个小时柱子，现在柱子压力降到46巴，和开始用的时候差不多了。
我还有个问题啊，我用的柱子型号：TSK-GEL SW Type 
                              Steel Cloumn SWXL 7.8x30(cm x cm) 
（说明书丢了）这种型号的柱子可以用纯甲醇冲么？我一般就用10%甲醇冲。保存得用什么溶液保存？
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
madong5758
madong5758
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2007/10/16 16:31:00 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
安捷伦1100
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
手机版： 【求助】求高手帮忙！十万火急！
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
头像
高级回复 发表评论
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁