主题:【讨论】有没有用液相做氨基酸分析的?

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用柱前衍生化,测定16种氨基酸,氨基酸总和总比粗蛋白高,如果是样品前处理的问题,那问题应该是出在哪里呢??酸水解时间的影响?目前是水解22小时,上机的样品瓶是用浓硝酸泡过,重复使用的,瓶盖隔垫也是重复使用的?这些会不会存在污染?

我们做的一样,建议你用内标法处理看
pchduan
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能具体说一下你的衍生方法吗?包括衍生试剂、定容试剂、稀释试剂等
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用柱前衍生化,测定16种氨基酸,氨基酸总和总比粗蛋白高,如果是样品前处理的问题,那问题应该是出在哪里呢??酸水解时间的影响?目前是水解22小时,上机的样品瓶是用浓硝酸泡过,重复使用的,瓶盖隔垫也是重复使用的?这些会不会存在污染?

我们做的一样,建议你用内标法处理看

用什么做内标物呢?
glory143
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能具体说一下你的衍生方法吗?包括衍生试剂、定容试剂、稀释试剂等

衍生试剂、定容试剂、稀释试剂分别是OPA,水,水,定容和稀释试剂会不会有问题?或者是水本身有问题?我们用的怡宝纯净水
我的8090
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用柱前衍生化,测定16种氨基酸,氨基酸总和总比粗蛋白高,如果是样品前处理的问题,那问题应该是出在哪里呢??酸水解时间的影响?目前是水解22小时,上机的样品瓶是用浓硝酸泡过,重复使用的,瓶盖隔垫也是重复使用的?这些会不会存在污染?

我们做的一样,建议你用内标法处理看

用什么做内标物呢?

我们做是a-氨基丁酸,也可用其他样品里面没含有的
懿切瀡緣
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hucharming
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检查你的标样,是一直都在用吗,有分装的话,换换做,是用内标定量的吗?
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标样是安捷伦的,一直在用。是外标定量,是标样问题的可能性不大吧
glory143
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感谢各位的意见,问题的原因基本可以确定是稀释溶剂引起的,明天再做一下重复实验做进一步确定
pchduan
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可以考虑换定容试剂和稀释试剂,我用的定容试剂和稀释试剂分别是碳酸氢钠和磷酸二氢钠
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