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液相色谱（LC）
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主题：【讨论】如何计算液相色谱柱的空体积?

浏览0 回复13 电梯直达
gentlehorse
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发表于：2008/05/22 18:56:20 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
由于在梯度分析时，需要平衡色谱柱，其中平衡所需流动相的体积大概是根据色谱柱的空体积推算的（当然还要看色谱图基线是否平整，压力是否稳定）。
那色谱柱的空白体积是如何计算呢，平衡柱子需要多少倍的空体积呢？
以150mm*4.6mm, 5um粒径的柱子为例。
请大家各抒己见，谢谢。
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2008/5/22 22:08:16 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主会算圆柱体的体积吧？
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zhuxiugao
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2008/5/22 22:11:37 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
空体积好像在色谱柱的说明书中应该有吧？如果没有你可以利用以前的图计算一下，死时间乘流速
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hrcren
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2008/5/23 1:55:25 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
论坛上有一篇相关的帖子，不是很对口，但也许值得一看
链接如下：
http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20070710/904621/
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hrcren
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2008/5/23 2:05:24 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不被固定相吸附或溶解的物质进入色谱柱时，从进样到出现峰极大值所需的时间称为死时间

试样从进样开始到柱后出现峰极大点时所经历的时间，称为保留时间

某组份的保留时间扣除死时间后称为该组份的调整保留时间，即
tR′ = tR-tM

死体积可由死时间与流动相体积流速F0（L／min）的乘积计算：
VM = tM·F0 

保留体积指从进样开始到被测组份在柱后出现浓度极大点时所通过的流动相体积。保留体积与保留时间tR的关系如下：
VR = tR·F0

某组份的保留体积扣除死体积后，称该组份的调整保留体积，即          VR′ = VR- VM

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icecoffee
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2008/5/23 19:02:44 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
其實不用計算的呢
平衡柱子約用10分鐘就ok了
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hjyang0301
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2008/5/23 20:55:29 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主给出了柱管尺寸，和填料直径，如果填充绝对均匀，是可以当做一到几何题来算，空白体积的！

不过，柱子在用的时候都是被溶剂浸润，干体积没多大用处！

空白体积可以用死时间*流速得到，C18对NaNO3是没有保留的，比较好的办法是，进一针NaNO3，保留时间*流速，就可以得到从进样器到检测器的死体积，然后计算管路和部件死体积，就可以得到柱死体积！
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gentlehorse
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2008/5/23 21:11:18 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 flyaway 发表:
楼主会算圆柱体的体积吧？

呵呵,但是柱子里面是有填料的啊，实际体积肯定要比圆柱体的体积要小啊
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深海的海豚
lqqer
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2008/5/23 22:11:35 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 gentlehorse 发表:
呵呵,但是柱子里面是有填料的啊，实际体积肯定要比圆柱体的体积要小啊

如果单纯计算冲柱子用的柱体积，不需要扣除填料的啊！填料有N多孔，不需要精确计算的，按照圆柱体积粗略计算就可以了。
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2008/5/23 23:15:37 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
谢谢.那一般在梯度程序中,回到初始梯度需要多少倍柱体积的流动相来平衡柱子呢?
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Last edit by gentlehorse
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2008/5/27 19:56:22 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一般要至少10倍的柱体积,当然这也要看所用的流动相系统,比如缓冲盐或离子对体系就要平衡时间长些.最后判断平衡与否的依据是基线及压力的平稳,前后进样保留时间的一致.
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