主题:【求助】样品峰不能基线分离怎么办

浏览0 回复40 电梯直达
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baiyuping
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样品溶液的本底影响吧,注意样品的前处理,应该能好些
风烟
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xiaosese
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样品应该前处理,纯化比较好,这样容易减少杂质的影响
vickey-gxy
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标样能走好,说明是样品的问题.样品需要进一步提取纯化.
calfstone
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原文由 lnlcsf 发表:
大家好,我是研二的学生,刚开始做液相,做的是有关酚类物质的定性和定量分析,走标样的时候,都能够基线分离,但同样的条件却不能使我的样品峰基线分离,峰总是一波未平一波又起,我不知道怎么办?
我用的是甲醇:水(0.1%H3PO4调节pH=5)希望大家帮帮忙,看问题的关键出在哪里,谢谢

经常的问题哈。由于具体样品的基体未知,做HPLC永远要解决的就是样品净化的过程和色谱条件的优化。我们一般的思路都是以混合标准来做色谱条件的优化,但往往一上样品就恼火。建议:
1、以加标样品作为你色谱条件优化的目标,考虑多点的样品净化,如SPE,CPE等。
2、可用化学计量学中的二阶校正方法,在干扰存在情况下准确定量,但需要二阶数据,如DAD或MS/MS
lnlcsf
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谢谢大家的宝贵意见,我已经着手在尝试了,我稀释了样品,10倍,但效果并不是很理想,样品的纯化,我又不知道从什么地方着手,刚换了流动相,希望会好一点。有关样品的纯化问题,实在是很头疼,主要是不知道那些杂质都是什么,很烦哦:(
lnlcsf
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嗯,谢谢宝贵意见,我正在更换流动相,样品稀释后效果不佳,样品的纯化也很麻烦,不知道杂质都是什么,呵呵呵
lnlcsf
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原先有的方法,不过我发觉不适合我用,又在原来的基础上进行了改良,总处的混标很好,都能基线分离,而且响应值也很高,一走样品,我的天,什么东西呀?呵呵呵,对了,目标峰的响应值也一般
天空之城
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可以尝试加几滴酸试试,我做过游离酚的检测,因为其流动相要调酸,所以为保持其相容我们会在其试样和标样定容前加几滴酸让其颜色变无或变浅。
天空之城
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对了,你在调流动相的pH时,是怎么做的呢?不会是混合后才调的pH吧,我们都是先将二次蒸馏水量好,加稀磷酸调至所需的pH范围内,再将其与量好的甲醇混合,待其冷却至室温超声处理15min
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