主题:【求助】谁能详细说说测光致发光除倍频吗?

浏览0 回复3 电梯直达
juvense
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查了以前的帖子
好像有3种方法
1.加滤光片。PE公司的光谱仪好像只有***nm截止,就是说接收器前的滤光片可以把***nm一下的波全部去掉,这对于激发波长小于荧光发生的波长是可以的。但是如果激发波长大于发射波长呢?
2.用软件去除。请问用什么软件?
3.同步扫描?就是pre-scan吗?
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原文由 juvense 发表:
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好像有3种方法
1.加滤光片。PE公司的光谱仪好像只有***nm截止,就是说接收器前的滤光片可以把***nm一下的波全部去掉,这对于激发波长小于荧光发生的波长是可以的。但是如果激发波长大于发射波长呢?
2.用软件去除。请问用什么软件?
3.同步扫描?就是pre-scan吗?
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1)PE这个档次的仪器应该不会出现反思托克斯位移的。
2)软件去除不了,要去除就是你手动的事情了。
3)要看你测试目的了,同步扫描的光谱和常规的激发/发射光谱是不一样的。
weiwang115
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1. 加高通截止滤光片是最常见也最有效的方法。正如二楼所说,反stokes现象在常规的分子荧光仪器上是记录不到的;
2. 所谓的软件处理,可能是在得到的复合峰(荧光峰+倍频峰)基础上减去倍频峰(因为一般散射峰服从高斯分布,且强度较高,峰形较为明显)获得。这个方法理论基础不好,操作性也不好,不到万不得已一般也没什么人用;
3. 同步荧光光谱(synchronous fluorescence)也是一个很有效且常用的避免倍频峰干扰的手段,绝非pre-scan方法。但它已经很不同于常规的发射光谱。建议楼主好好查阅同步荧光的原理和操作。
meanme
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