实战宝典 原创大赛 仪器问答 仪友会 总帖：8091923今日发帖：10 我的社区 签到
快速导航 采购仪器 提醒
液相色谱（LC）
版主:
入住本版
专家:
居民列表

主题：【求助】Agilent1100 检测蛋白没有峰怎么回事？

浏览0 回复6 电梯直达
liugy04
头像
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
发表于：2008/09/24 20:30:12 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
悬赏金额：20积分 状态： 未解决
各位老师大家好，我刚接触使用Agilent 1100系统检测蛋白，用的是Agilent Zorbax GF-250的柱子，1100进样是用的手动进样器。有个很奇怪的现象，用相同的标准品（蛋白marker），在load状态下进样4～5次，每次进样20ul，inject后平均只有一次有峰，其余的都没有任何峰出现。
  因为样品是糖蛋白，纯化损失很大得率很小，所以在没搞清楚前不敢随便浪费，还希望有经验的老师不吝赐教！谢谢了！
我来回答
为您推荐
近期热榜
热门活动
您可能想找: 气相色谱仪(GC) 询底价
选参数 看心得 找厂商 查方案
专属顾问快速对接
立即提交
可能感兴趣
爱杰杰
zhchen1130
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2008/9/25 9:00:59 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你们是做含量还是分子量啊？
    还有，你的定量环是多大的？20ul的定量环只能准确进样10ul以下，想准确进样20ul需要进100ul左右才行
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
It is me!
hmzhou83
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2008/9/25 9:03:42 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
有可能蛋白还在柱子上没有下来，你可以尝试一下其他条件。或者干脆就清洗柱子，再看看有没有蛋白下来。。。
我估计蛋白在柱子上没下来。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
liugy04
liugy04
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2008/9/25 15:29:53 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
测定纯度和分子量，用的20ul的上样环，问题是每次进样量相同，方法也是一样，进同样的东西有时有峰有时没峰，因为浓度高峰还挺大。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
liugy04
liugy04
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2008/9/25 15:31:44 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 hmzhou83 发表:
有可能蛋白还在柱子上没有下来，你可以尝试一下其他条件。或者干脆就清洗柱子，再看看有没有蛋白下来。。。
我估计蛋白在柱子上没下来。


这个可能性倒是没考虑过，不过凝胶过滤的柱子回收率应该挺高的
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
liugy04
liugy04
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2008/9/25 15:33:55 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 zhchen1130 发表:
你们是做含量还是分子量啊？
    还有，你的定量环是多大的？20ul的定量环只能准确进样10ul以下，想准确进样20ul需要进100ul左右才行





测定纯度和分子量，用的20ul的上样环，问题是每次进样量相同，方法也是一样，进同样的东西有时有峰有时没峰，因为浓度高峰还挺大。

赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
BBN007
lsl19800520
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2009/3/31 11:56:14 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
调整流动相的比例，把样品溶液浓度加大，把定量环改成200uL，我原先做过G-CSF纯度，按上面提到的逐项改变，试一试。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
手机版： 【求助】Agilent1100 检测蛋白没有峰怎么回事？
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
头像
高级回复 发表评论
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁