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透射电镜（TEM）

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主题：【求助】小鼠的卵细胞的电镜标本的制备急

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piaomiaoxinxin

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发表于：2008/10/28 08:37:04 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

我要做的是小鼠的卵细胞的电镜，但是我所能获得的卵细胞的数量有限的，不知道有什么技巧可以保证细胞能包埋进去，听说有人做了好几次就没有作出来呀急哦谢谢大家了

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2008/10/28 20:14:06 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

首先，所有操作步骤你都需要在解剖显微镜下操作，同时你需要一个毛细吸管操作；其次，注意固定、脱水、浸透的处理时间，不能超过1分钟；最后，切片时需要有一双好的眼睛，因为单细胞经锇酸固定后的颜色和包埋剂的颜色极为相似，还要有足够的耐心修块和切片。捞片时注意多捞几个铜网，因为运气不好的话捞上的切片细胞正好被铜网的栅格挡住了。一个包埋块里有可能的话多包点细胞进去，没准你修块时手一抖细胞就不见了。
GOOD LUCK！

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piaomiaoxinxin

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2008/10/28 22:58:39 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

谢谢楼上的回复，你的意思是说所有的操作的要在液滴中操作。但是在包埋的时候是否有什么技巧可以使细胞抱在中间，切片的时候好弄谢谢哦

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zhouzb

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2008/10/29 9:17:31 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

由于卵细胞体积小，重量轻，不可能象包埋组织一样放哪是哪，所以需要做的是在放入烤箱10分钟左右后取出，用注射器针头在解剖显微镜下将细胞慢慢拨到包埋模顶部，再放入烤箱。之后再过5分钟左右取出观察一下有没有移位，如果有需要再次拨动，没有就继续聚合好了。
我是做电镜标本的，向来是别人将标本取好后送到我这再做电镜部分的处理，不清楚卵细胞是怎么从鼠卵巢中分离出来卵细胞，不知能能否提供一个稍微详细点的卵细胞分离方法给我？Email：zhouzb#gmail.com，请将#变@，嘿嘿，防止恶意email收集软件收集地址。

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