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主题：【分享】生物样品前处理、制备、分离及保存器材

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zxm-1980
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2008/12/1 11:37:42 12楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 33443344 发表:
电动组织捣碎机


应用：一般用于动物组织，植物肉质种子，柔嫩的叶、芽等材料。国产的捣碎机最高转速可达1-2万转/分，因旋转刀刃的机械切力很大，制备较大分子样品很少使用。动、植物细胞30-45秒完全破碎，酵母菌和细菌需加入石英砂加强效果


原理：用可调速电机驱动捣碎转子（头）在高速旋转下将组织打碎达到匀浆目的。
市售仪器多数是可调速机型，有不同口径、头端式样的转子供选择，平头转子适于制备乳浊液及悬浮液，锯齿状转子适于制备组织和含纤维物质的匀浆。


这个就相当于手持电动的均质器吧,看下面很像.
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yuduoling
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2008/12/1 13:28:13 13楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
非常详细的资料,跟培训教材差不多,多谢楼主无私分享
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2008/12/1 20:42:22 14楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊

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2008/12/1 20:44:50 15楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
干燥：除掉潮湿的固体、膏状物、浓缩液和液体样品中的水分及溶剂的过程。
目的：提高样品的稳定性，以供进一步的保存分析。
方法：
    1.常压吸收干燥
    2.真空干燥
    3.冷冻干燥
6.1 常压吸收干燥器材
常压干燥是指在密闭的空间或干燥器内使用干燥剂进行的干燥。




常用干燥剂及性能：
1.无水硫酸钠：中性，价廉，吸水量大，但作用慢，效力差。
2.无水硫酸镁：中性，效力中等，作用快，吸水量大。
3.无水硫酸钙：作用快，效率高。与有机物不发生反应，不溶于
                      有机溶剂，缺点是吸水量小，可用于二次干燥。
4.固体氢氧化钾（或钠）：可吸收水、氨和胺类。钾比钠的吸水
                                      能力大60-80倍。
5.五氧化二磷：吸水、效力最高、作用非常快，但价格较贵。
6.氧化钙：即生石灰，碱性，吸水后成为不溶的氢氧化物，价廉
7.分子筛：泛指具有均一微孔而能选择的吸附直径小于其孔径的分子的那些吸附剂。如沸石分子筛，碳分子筛等，其中常用沸石分子筛。
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2008/12/1 20:45:57 16楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊

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2008/12/1 20:47:36 17楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
6.2 真空干燥
原理：在抽真空的容器中压力降低则溶剂的沸点也就降低，蒸发速度加快。

适用于干燥不耐热的样品。

实验室内常可利用的组合器材有：
真空干燥器（箱）、冷凝管及真空泵

真空干燥器（箱）

1.市售有玻璃和特殊塑料两种。
2.真空度不宜过高.以上盖推不动即可.
3.使用新的干燥器前，一般先须作耐压试验。
4.处理危险或有毒样品时，干燥器外应罩铁丝网或用布包扎。
5.打开干燥器取样时放入空气不要过快，以免冲散样品。也可在通气口处放一小片洁净滤纸。
6.选择合适干燥剂，待干燥物所含溶剂不止一种时，可在干燥器内同时放两种干燥剂。

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2008/12/1 20:49:31 18楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
6.3 冷冻干燥

概念：亦称“冻干”，即先将溶液或混悬液冷冻成固态，然后在低温和高真空度下使冰升华，留下干燥物质的过程。
原理：水有固态、液态、气态三种态相。根据热力学中的相平衡理论，随压力的降低，水的冰点变化不大，而沸点却越来越低，向冰点靠近。当压力降到一定的真空度时，水的沸点和冰点重合，冰就可以不经液态而直接汽化为气体，这一过程称为升华。冷冻干燥就是基于这一原理

冷冻干燥的特点
1.在低温高真空度下进行，样品不起泡，不爆沸。干物不粘壁，易取出，而且成为疏松的粉块，极易溶于水。
2.适于对热敏感、易吸湿、易氧化及溶剂蒸发时易产生泡沫而引起变性的样品（如：蛋白质、酶、核酸等）
3.并非所有生化物质都能在冻干时稳定。冻干前应先小量试验。


应用干燥罐进行冷冻干燥的步骤

1.将待干燥样品置于培养皿样容器内（厚度不超过1cm），先在冰箱内冻成硬块。
2.准备真空干燥器，内置两个培养皿分别放固体KOH(NaOH)及P2O5,迅速取出冻块放入干燥器。
3.干燥器与真空泵相连，管中要有足量的P2O5，两端塞棉花，注意切勿使P2O5和水进入油泵。
4.抽真空后，经过5-10个小时，可得冻干品。


应用圆底瓶进行冷冻干燥的步骤

1.样品置耐压的圆底烧瓶中，将瓶浸入干冰-乙醇混合物内，使瓶内物迅速冻结成硬块，然后连接高真空度的真空泵。
2.如霜层全部融化，用手接触烧瓶不感到冷，就表明升华已经停止。
3.为了效果更好，可适当升温或延长真空时间以彻底脱水

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2008/12/1 22:58:01 19楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
冷冻干燥的注意事项
1.连接泵的管道口径不宜过小，否则降低干燥效果。
2.减压时加温（45℃）可以加速蒸发，但以不使样品解冻为限。
3.烧瓶外通常蒙上一层霜，如果霜层开始融化，冻块起泡应立即停止。检查并排除故障后将样品重新冻结，继续冻干。

旋转冷冻离心式冻干机
其主体类似于小型离心机，转头多为六角形，有24孔或36孔位，可放1.5/2.0ml离心管，转速1800rpm.与真空泵相连。

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2008/12/1 23:18:41 20楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
旋转冷冻离心式冻干机

原理：高速旋转中的样品上面的压力降低导致迅速蒸发，利用蒸发的冷却作用可以使样品降温直至冻结。

应用：适用于快速小量的样品，而无需制冷设备，尤适于分子生物学实验室制备核酸等微量样品。

优点：
1.在常用的冻干机中，如果使样品上面的压力降低就会引起沸腾和起泡，导致样品损失量。应用旋转冷冻装置可以避免。
2.旋转的离心力能够迫使部分样品沿管壁升高，从而减少样品的厚度，增加表面积。
3.并不需要在整个冻干过程中连续旋转，样品冻结后转子停止旋转而冻干过程仍然继续进行。
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y-y
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2008/12/3 16:36:21 21楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
仔细看完了，受益匪浅，谢谢！
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