主题：【讨论】有多少人用二维液相？

我还没有用过。
二维液相在生命科学领域的使用较多。

原文由 doxw0323 发表:
我在论坛里找到两篇关于二维液相的资料帖，但发现大家关注的也不多。
不知道有多少人用过，了解。
怎么判定是否二维？
我打算用预浓缩柱，加了这个预浓缩柱，也可以叫二维了吗？

好像预柱浓缩还不是二维液相，只是在线样品前处理而已。

还真的没用过，要学习下

二维液相跟我们的普通液相有什么区别？

二维液相色谱原理
二维液相色谱(2D—LC)是将分离机理不同而又相互独立的两支色谱柱串联起来构成的分离系统。样品经过第一维的色谱柱进入接口中，通过浓缩、捕集或切割后被切换进入第二维色谱柱及检测器中。二维液相色谱通常采用两种不同的分离机理分析样品，即利用样品的不同特性把复杂混合物(如肽)分成单一组分，这些特性包括分子尺寸、等电点、亲水性、电荷、特殊分子间作用(亲和)等，在一维分离系统中不能完全分离的组分，可能在二维系统中得到更好的分离，分离能力、分辨率得到极大的提高。完全正交的二维液相色谱，峰容量是两种一维分离模式单独运行时峰容量的乘积。假如两种分离系统都有100的峰容量，那么良好的二维系统理论上可产生10000的峰容量。
二维液相色谱大多使用两支或多支色谱柱，并通过柱结合技术实现样品的柱间切换。柱切换通常可分为部分和整体切换两种模式。按切割组分是否直接进人二维中，二维分离又可分为离线和在线两种方式。早期的中心切割技术，大都先在容器中收集一维洗脱产物，再进样到第二维中。随着现代仪器的发展和适应自动化分离的需要，目前二维色谱大多采用在线方式，使一维洗脱产物(部分或全部)直接进入到第二维柱系统中进行分离分析。
部分模式即采用中心切割技术，只使第一维分离的部分感兴趣的组分进入第二维中进一步分析。为了将样品有效地转移到下一维柱系统中，必须先在第一维分离模式中用标准物进行实验，根据得到的分离信息设计切换程序。部分模式不能得到样品所有组分的信息，此外，还有操作繁琐、样品易损失与污染及可能降低分辨率等缺点。
整体模式即全多维液相色谱模式(comprehensive HPLC)。基于Giddings 的理论，一般认为全多维分离应满足3个条件：(1)样品的每一部分都受到不同模式的分离；(2)所有样品组分以相等的比例(100％或稍低一些，即并不要求100％分析物，只要分流的部分能代表所有样品组分信息即可)转移到二维及检测器中；(3)在一维中已得到的分辨率基本上维持不变。“基本”指通过测量全二维中第一维轴上的某个特殊峰所对应的第一维的分辩率与一维情况相比减少不超过10％。其中，第一条和第三条说明了传统的中心切割技术与全二维的区别。Schoenmakem等 认为在二维分离之前进行分流也可称为全二维分离，进一步拓宽了全二维分离的概念。
在全二维系统中，从一维洗脱出来的不连续的组分，有规则间隔的进入下一维分离模式中。Frei等 采用SEC／RPLC分离植物萃取物，建立了二维液相色谱的基本框架。Jorgenson等 改进了Frei的方法，使一维洗脱产物全部进入第二维系绮中，实现了真正意义上的全二维液相色谱分离。一维洗脱产物进入第二维系统，要考虑两者的兼容性。Murphy等 指出对同步采样来说，从一维洗脱出来的组分的任一个峰要在下一维中至少进样3次；而对非同步采样，则至少要进行4次采样。进入第二维分离的采样时间越短，整个系统的选择性就越高。
基于不同的分离目的，可以采用不同分离机理的柱系统构建多维液相色谱分离系统，离子交换色谱(IEC)、反相色谱(RPLC)、亲和色谱(AC)、尺寸排阻色谱(SEC)和正相色谱(NP)等分离模式皆可以组合用于特殊目的的分离。对于两种分离模式的组合，不仅应考虑分离选择性、分辨率、峰容量、柱容量及分析速度等因素，对于生物样品的分离、样品回收率和活性等因素也可能非常重要。在实际多维分离系统的构建过程中，必须综合考虑不同因素的影响，选择合理的分离模式和柱系统。

感谢小多的指教。
二维液相色谱大多使用两支或多支色谱柱，这个色谱柱，是同以类型的柱子吗 ？
有什么要求吗？
我用的zorbox bonus-rp的柱子，a的耗材上没有预浓缩柱，问工程师，是有的。也有对应的预浓缩柱。是否要选择同样的柱子？
第一维进入的第二维的时候，流动相是否要改变呢？

在全二维系统中，从一维洗脱出来的不连续的组分，有规则间隔的进入下一维分离模式中。Frei等 采用SEC／RPLC分离植物萃取物，建立了二维液相色谱的基本框架。
我只进一个单一样品的时候呢？
怎么规则间隔呢？

应该是从通路上解决，即将第一根色谱柱中不要的东西排除，截取需要的部分进入第二根色谱柱，进行分离分析。

感謝小多大大分享!

这个东西值得研究  我在气相色谱上面做过 液相上面还没做过  都是自己改仪器 弄起来比较麻烦  商品话的二维系统应该价格不便宜  我们这些穷人还是不要想了

原文由 小不董(doxw0323) 发表:
我在论坛里找到两篇关于二维液相的资料帖，但发现大家关注的也不多。
不知道有多少人用过，了解。
怎么判定是否二维？
我打算用预浓缩柱，加了这个预浓缩柱，也可以叫二维了吗？

当然不算，二维液相是两根色谱柱串联！