主题:【讨论】液相色谱中,在连续两个单进样之间平衡色谱柱重要吗?

浏览0 回复17 电梯直达
雾非雾
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如果平衡时间不够,流动相的比例不稳定,出峰时间也会受影响,会影响定性定量的。
tanggangfeng
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原文由 cherry_sun 发表:
最近在学习用UPLC,样品一个一个的做,流动相选择的都不同,我只是在测完一个就用大比例有机相洗一两分钟柱子(反向柱),然后执行下一个样,流动相往往立刻切换。
  昨天看资料上有提到平衡色谱柱的概念,请问这个是什么时候用,作用大吗?我的理解是一个样品测完,改为下一个样品的初始流动相比例流一段时间再进下个样品,对不?


切换不同的流动相是需要冲洗平衡色谱柱,但要冲多少时间,要看的你流速和柱子长短,uplc既然是超高速,你的流速应该很高,柱子应该也比较短吧。
你比较记下时间多长时间可以走稳,应该是很快的。
tanggangfeng
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原文由 cherry_sun 发表:
原文由 bestalian 发表:
原文由 cherry_sun 发表:
最近在学习用UPLC,样品一个一个的做,流动相选择的都不同,我只是在测完一个就用大比例有机相洗一两分钟柱子(反向柱),然后执行下一个样,流动相往往立刻切换。
  昨天看资料上有提到平衡色谱柱的概念,请问这个是什么时候用,作用大吗?我的理解是一个样品测完,改为下一个样品的初始流动相比例流一段时间再进下个样品,对不?

流动相的切换前,要先用异丙醇冲洗系统,后换上要使用的流动相,而且还要平衡一段时间,就是楼主说的流一段时间的流动相,再进样。否则样品的保留时间变化很大的,

为什么要用异丙醇冲洗系统呢?那就是要准备一个异丙醇色谱瓶了,机器上有4个管路,分别是A1A2B1B2,我放哪个合适呢?


不需要用异丙醇冲洗, 异丙醇用在反相与正相切换时才用到,其他时候用的很少的,反相柱,一般用甲醇或乙腈冲洗即可。
毛毛虫
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爱杰杰
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原文由 cherry_sun 发表:
最近在学习用UPLC,样品一个一个的做,流动相选择的都不同,我只是在测完一个就用大比例有机相洗一两分钟柱子(反向柱),然后执行下一个样,流动相往往立刻切换。
  昨天看资料上有提到平衡色谱柱的概念,请问这个是什么时候用,作用大吗?我的理解是一个样品测完,改为下一个样品的初始流动相比例流一段时间再进下个样品,对不?



必须要平衡一段时间,否则出峰的保留时间会又出入
fengxuemei
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改变流动相后,至少要等基线走平稳后才能开始做样。
用新的流动相冲洗的时间看你柱子平衡能力,只要基线走好了就可以分析样品了。
flyaway
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原文由 cherry_sun 发表:
最近在学习用UPLC,样品一个一个的做,流动相选择的都不同,我只是在测完一个就用大比例有机相洗一两分钟柱子(反向柱),然后执行下一个样,流动相往往立刻切换。
  昨天看资料上有提到平衡色谱柱的概念,请问这个是什么时候用,作用大吗?我的理解是一个样品测完,改为下一个样品的初始流动相比例流一段时间再进下个样品,对不?

UPLC 柱子是什么规格的,流速是多少?
如果流速很快,2min左右也未尝不可
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