主题：【分享】参比波长与检测波长----来源于板油

这几天看到大家对参比波长和检测波长出现比较多的疑问，故整理下帖子，供板油们参考：


是用紫外可见分光光度计进行全扫描,然后选择最大吸收的波长，如果有几个最大吸收波长的时候，选择杂质峰较少的波长做测定波长。检测波长不是参比波长，只有很少物质测定需要用到参比波长，参比波长主要起到消除噪音的影响
选择参比波长的依据是被测样品在参比波长处没有吸收，参比波长应尽可能的接近检测波长。说白了，参比波长就是空白对照的作用如果把参比波长值设成检测波长，样品在紫外光下无吸收。


参比波长应设在样品没有吸收的地方，且越靠近样品的检测波长越好。

选择参比波长是为了更好的消除噪音的影响。一般参比波长的选择依据是样品在参比波长没有吸收，同时跟检测波长相差不是太大，应尽量靠近，以便消除干扰物质的影响。就象做紫外分光光度计的实验，选择参比溶液一样，为了消除空白溶液中物质的干扰。

下面是一个关于参比波长选择的例子：

例：X和Y是两种吸光物质的吸收曲线，现采用双波长吸光光度法对它们进行分别测定。如图所示如何选择参比波长及测量波长。

（1） 测量X时，Y可视为干扰物质。则选择l1作为测量波长，l2作为参比波长，因为l1和l2两处Y的吸光度相等，可以用以消除Y对X的干扰。
                                                       

（2） 测量Y时，X可视为干扰物质。则选择l3作为测量波长，l4作为参比波长，因为l3和l4两处X的吸光度相等，可以用以消除X对Y的干扰。

                                                       




如果你的检测器可以设参比波长，应该是dad或者mwd 检测器。这类检测器的。检测的不是你实际设的波长，比如你设的234，16nm .450,80.表示检测器检到的从226-242nm的紫外吸收图，再平均得到一个数据，参比设置也类似，然后2个相减，就是工作站上显示得到峰高和峰面积。
如果你的样品刚好在234nm,吸收最强，你可以设到234，2nm.（资料上一般写频宽宽度设置是最大吸收峰的半峰宽的宽度） 如果你的样品在410-530nm有紫外吸收，你可以把参比设的更高，或者干脆不设参比。