GB/T5009.82-2003 食品中维生素A和维生素E的测定解析:标准中有第一法 高效
液相色谱法和第二法 比色法,而比色法只能测定维生素A,且方法更复杂,不可取。而第一法也有很多人不明白为什么这么复杂?我简单介绍下:
1.乙醚、乙醇为什么要处理?
从数据的准确性来说,乙醚和乙醇中含有过氧化物和醛类都会与维生素A、E反应,造成结果偏低。不过用好点的试剂可以省了这步,试剂对结果的影响只是一个小误差。
2.标准为什么要标定?
维生素A、E的固体都不是很稳定,就算你新买来的,纯度也很难到99%以上。时间稍微长点就只有80—90%或更低,所以要标定。
3.为什么要用内标?
萃取的步骤很多次,提取也复杂,而且萃取也易乳化,用内标法更准确。
存在的问题:高效
液相色谱法是目前的通用方法,但是对于刚做的人来说是有很多地方摸不着头脑。标准中标准品的皂化和标定问题解释的不清楚,我个人觉得会造成了检测人员只能按部就班。而我论坛也看到有人发帖问出峰的问题(
http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20060413/392852/)。
解决方法:1.首先我们要清楚标准品的问题:目前购买这两个标准品的时候,很多品名就写维生素A和维生素E,如果你不清楚标准品的问题就会出现
http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20060413/392852/这个帖子的问题。维生素A它包括了视黄醇和视黄醇乙酸酯,这两个物质的结构是不一样的,所以你用
液相测定的时候两个物质的保留时间也不一样,视黄醇乙酸酯经过皂化后就变成了视黄醇;同样的道理,维生素E也包括了生育酚和维生素E乙酸酯,其中生育酚有包含了α-生育酚、γ-E生育酚、δ-E生育酚,乙酸酯经过皂化后就变成了生育酚。乙酸酯类一般都是人工合成的,为了其稳定性,所以做成乙酸酯型。人工添加的维生素E乙酸酯造化后都转化成α-生育酚,γ-E生育酚、δ-E生育酚只有天然维生素E才含有的。
http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20060413/392852/这个帖子的问题其实就是楼主没搞明白这点,我估计是标准品不对造成的标准品与样品的保留时间不一致。(如果还不明白可以回复帖子提问再探讨)
2.方法的改进:标准中加100g/L的抗坏血酸5mL,且标注临用前新配,那是因为抗坏血酸(既维生素C)易分解,由于方法中加抗坏血酸的作用主要是抗氧化,所以抗坏血酸多点对实验的结果无影响。可以把抗坏血酸溶液改加少量的抗坏血酸固体,这样更方便且抗坏血酸好保存。
3.以下是几个经常用到的中维生素A和维生素E的测定方法:
GB/T 17817-1999 饲料中维生素A的测定 高效
液相色谱法
GB/T 5413.9-1997 婴幼儿配方食品和乳粉 维生素A、D、E的测定
GB/T 9695.26-2008 肉与肉制品 维生素A含量测定
GB/T 9695.30-2008 肉与肉制品 维生素E含量测定
虽然是列了一小部分,但是有此可见其存在的问题,不过方法都是皂化处理,方法大同小异,原理一样。只要你把方法吃透了,所有的这些标准都可以用一个方法来做。