紫外可见分光光度计(UV)

主题:【讨论】一个板油的问题,大家一起讨论下,哈哈

浏览0 回复6 电梯直达
初学者&九点虎
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向您请教几个问题: 
(1)在UV-2550中基线调整时,两池中都放空白样,调完后再在样品池中放入样品进行测量,对吗?还是只放比色皿进去,什么都不放?
。 
(2)对于动力学,光度测定和光谱测定调基线都一样的方法吗?这三种方法都要调基线吗?三种情况下基线范围设置有何不同? 
(3)到波长又是出于什么考虑?我看到资料中调基线后,再到波长500nm(能量最强),那么动力学中测某一物质310nm下的吸光度随时间的变化时,到波长是不是310nm?或者该怎么调?三种测量中到波长都一样的设置吗? 
我是新手,看了一些资料,但还是有些不懂,还望多多指教! 谢谢

首先明确一个问题:在过光谱扫描的时候做基线,在2550仪器软件uvprobe中就是在光谱模块里才做基线,在光度模块和动力学模块时是不做的。
  我的习惯在做光谱扫描的时候一般不用参比光路,所以只在样品中放入空白进行基线。在做基线时一定要注意以下几个问题:
1 波长范围,如果你的样品在300-600范围内,那你要在290-610做基线,这样才能保证你的样品光谱图。
2 扫描速度,一般建议中速
3 光谱带宽 一般选择0.5nm比较好,你也可以看看我发的一些资料,里面有介绍。
第三个问题,先到500,再做基线,是因为500能量最强。做基线是把每个波长点的吸光度都调到零点。试想如果能量最强的都调到零了,那别的波长点肯定没问题。
动力学我不是很熟悉,如有不妥的地方,大家互相讨论。
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到500nm波长调零是为了消除参比池与样品池之间本身的误差.因为每个比色池不可能做得完全一样.
  而前面的baseline就是将单个比色皿(装蒸馏水或溶解样品的溶剂)的吸光度调零(也就是透光率100%).
  所以baseline 与 autozero 的意义是完全不一样的.

  把参比与样品池之间的误差消除后,就可能直接话东西到样品池进行测定了.
mengzhaocheng
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