原文由 微雨燕双飞(godblesschina) 发表:
下列情况pH值会影响色谱峰的峰形:
化合物为弱酸或弱碱,流动相的pH值会影响化合物的存在形式。比如某一含羧基的化合物,其pKa为5.0,那么pH值大于7.0时,该化合物99%以上的分子以解离态存在,pH值小于3.0时,该化合物99%以上的分子以不解离态存在,这两种pH值下,均能得到较好的峰形,pH值处于3.0~7.0之间时,解离态和为解离态均大量存在,往往会导致拖尾甚至肩峰。因而,应了解化合物离子基团的pKa,以便调节流动相的pH值处于合适的范围,使某一种形态占绝大多数(99%以上)。
弱碱(主要为氨基化合物),氨基共轭酸的pKa一般处于9~10之间,通常把流动相pH值调到中性,是化合物成解离态。强阴离子(磺酸基)、强阳离子(季铵基)往往需要用离子对-反相色谱法或离子交换色谱法。
有机化合物中的离子基团,比如氨基、羧基等等一般不是化合物的吸收基团,所以其解离与否对化合物的吸收影响较小。
原文由 yongw(yongw) 发表:原文由 微雨燕双飞(godblesschina) 发表:
下列情况pH值会影响色谱峰的峰形:
化合物为弱酸或弱碱,流动相的pH值会影响化合物的存在形式。比如某一含羧基的化合物,其pKa为5.0,那么pH值大于7.0时,该化合物99%以上的分子以解离态存在,pH值小于3.0时,该化合物99%以上的分子以不解离态存在,这两种pH值下,均能得到较好的峰形,pH值处于3.0~7.0之间时,解离态和为解离态均大量存在,往往会导致拖尾甚至肩峰。因而,应了解化合物离子基团的pKa,以便调节流动相的pH值处于合适的范围,使某一种形态占绝大多数(99%以上)。
弱碱(主要为氨基化合物),氨基共轭酸的pKa一般处于9~10之间,通常把流动相pH值调到中性,是化合物成解离态。强阴离子(磺酸基)、强阳离子(季铵基)往往需要用离子对-反相色谱法或离子交换色谱法。
有机化合物中的离子基团,比如氨基、羧基等等一般不是化合物的吸收基团,所以其解离与否对化合物的吸收影响较小。
理论上是那样,实际上还是有很大差别的