课题组有一同学苦于某个实验样品量太多,想用酶标仪代替分光光度计测定OD值。毕竟比色皿一个个测多辛苦,哪有酶标板来得顺畅。
我虽然觉得这个想法有点crazy,但一时也找不到太多反驳的理由。
毕竟两者原理几乎一样,而且酶标仪似乎功能更加全面;
可是如果真的可以完全通用,为什么那些方法和标准里为什么只字不提仪器可以是“紫外-可见分光光度计或连续波长酶标仪”呢?
思来想去还是决定先在网上查个意见
于是我在本坛挖出了06年的一个帖子
http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20060414/393995/这里面某些说法就不必再提了,肯定不是答案。
比如一个测的是光密度一个测的是吸光度的说法。其实OD和absorbance根本就是一回事(见
http://en.wikipedia.org/wiki/Absorbance)
又比如酶标仪用的是滤光片的说法。现在在科研领域,连续波长的酶标仪早就普及了,相对而言医用酶标仪还常有使用滤光片的。
我还见过一种说法,说一个是垂直光路一个是水平光路。此话倒是不假,可这种说法无法解决我的疑虑。作为终端用户,关注的只是准不准,符合不符合检测要求,至于实现的技术手段那是黑猫白猫的事情了。
不过,在那个帖子的最后一层,我看到这么一种说法
“分光光度计测量的是以空白溶液为参比,在约定厚度(一般为1cm)的量池中的相对吸光值。因此不同仪器,不同批次测量的数据具有同样的可比性。而酶标仪测定时其光路长度不确定,也无空白参比,得出的是特定条件下的绝对值,因此即使是同一台仪器,不同测量批次之间也其数据不具备直接的可比性。”
我觉得这种解释很有新意,而且似乎也颇有道理。但遗憾的是,话题直到这里就终结了,于是我想把这个话题继续,大家不妨来讨论一下,到底酶标仪和分光光度计有什么重要差别使得至今没有完全通用呢?