主题:【讨论】出峰时间和峰面积不重现

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鸿雁
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大家好,近期我在做毛细管电泳实验时,发现重复进样时出峰时间和峰面积都不重现,出峰时间依次提前,峰面积依次减小,我用的试剂为罗丹明6G染料,缓冲溶液为磷酸氢二钠溶液,如果说峰面积减小的话还可以接受,因为可能存在罗丹明6G吸附的问题,但是出峰时间依次提前会是什么原因呢?
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如果罗丹明吸附很严重的话相当于变相的给管内壁做了个涂层!
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i_am_ling
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对毛细管管壁的吸附比较大,可以选择一些有机的缓冲溶液试一试,比如Tris这类的!
鸿雁
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原文由 i_am_ling(i_am_ling) 发表:
对毛细管管壁的吸附比较大,可以选择一些有机的缓冲溶液试一试,比如Tris这类的!

如果吸附较大的话,那应该出峰时间拖后才对啊!怎么出峰时间总是提前呢?而且,拖尾现象也不是很严重啊
sunpengwjh
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原文由 鸿雁(3859085) 发表:
原文由 i_am_ling(i_am_ling) 发表:
对毛细管管壁的吸附比较大,可以选择一些有机的缓冲溶液试一试,比如Tris这类的!

如果吸附较大的话,那应该出峰时间拖后才对啊!怎么出峰时间总是提前呢?而且,拖尾现象也不是很严重啊

时间总是提前是不是柱子的前处理,也就是活化没有活化好呢?随着实验的进行,柱子在进一步被活化,电渗流也就增大了,迁移时间也就缩短了!可以看看柱子处理好了没有!
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