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液相色谱（LC）
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主题：【求助】请大家帮忙看看我的柱子是不是废了

浏览0 回复6 电梯直达
kuailedeadai
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发表于：2010/07/03 10:28:47 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊


大家好，我才接触液相不久，是一个新手，今天有个问题在此请教大家！！

前几天跑氨基酸，大约一周，一直在摸索方法。今天拿来跑儿茶素，跑标样的时候很奇怪，图见附件，我现在也不知道问题出在哪里了，所以在此请教大家，拜托拜托！

跑氨基酸的时候的流动相A：5mmolNaAc(pH=5.7，1L再加四氢呋喃（色谱纯）50ml。流动相B：甲醇（色谱纯）

样品处理方法： 衍生反应：将离心后上清液100μl样品，加入100μl pH=9（用NaOH调）的0.5mol/LNaHCO3，再加入100μL 1%FDBN。 暗处60℃加热60min，立马加入400μl 0.01mol/L KH2PO4（pH=7.0，醋酸调）摇匀，13000转离心。  

柱子是赛分的C18柱。我也不知道怎么描述我的问题，也不知道说清楚了没有。希望大家能够帮助我一下，看看是不是柱子真的要废了？谢谢大家了

附件：
求大家帮忙.doc
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2010/7/3 10:39:13 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
跑氨基酸的时候正常吗，一氨基酸柱都是专用的，混合的效果很不好，楼主儿茶素标样里有几个成分？
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2010/7/3 10:55:14 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
跑氨基酸的时候正常吗，一氨基酸柱都是专用的，混合的效果很不好，楼主儿茶素标样里有几个成分？

标样是8种儿茶素单体和咖啡碱共九种。跑氨基酸的时候因为条件还没摸好，图是这个样子的


[img=580,226]file:///C:/DOCUME~1/Leo/LOCALS~1/Temp/ksohtml/wps_clip_image-29534.png[/img]

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2010/7/3 10:56:59 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
请大家多多帮忙啊，因为我是个新手，旁边也没人能够指导我，谢谢大家了！拜托拜托！昨晚因为这个问题失眠，心里很着急！
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〓猪哥哥〓
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2010/7/3 14:55:43 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
峰型还好，柱子应该没有废，压力多大？塔板数呢？

你的标样成分很多啊
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lijin79833313
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2010/7/3 15:54:48 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不是柱子的问题，在试验下流动相条件吧。
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2010/7/3 16:31:04 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 lijin79833313(lijin79833313) 发表:
不是柱子的问题，在试验下流动相条件吧。

跑儿茶素的条件是很成熟的，流动相开始怀疑配错了，后来重新配过，不是流动相的问题呵呵
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