主题：【在线讲座33期】液相色谱柱使用疑难问题解析(答疑结束）

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plexu您好！我有以下问题想请教：
C18柱如果之前曾有些天一直保存在酸性环境中，会对柱子有什么损坏吗？ph在2左右。

pH2左右容易使键合在硅胶基质上的固定相水解流失，包括C18和封尾试剂的水解，封尾试剂相对更容易水解。不知道你保存的酸性环境是不是含有缓冲盐，如果不含缓冲盐，只是短期几天保存在酸性流动相中，也不必过份担心，最多相当于这几天一直在使用这根色谱柱，因此减少几天的使用寿命吧；有缓冲盐就麻烦一点，保存期间水分挥发可能会导致缓冲盐结晶在柱内析出，对柱子损伤很大。

没有缓冲盐的，那就好，但是对于峰形的问题还是很发愁，昨天还出了一个问题，同一个样品，在一台仪器上出来时分叉的峰，在另一台是一个峰，并且纯度还蛮高的，出封时间在8-10min，不知道咋办了，所用的条件应该是一样的

两台仪器用的是一根柱子不？如果不是一根柱子就说明是柱子的问题

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plexu您好！我有以下问题想请教：
C18柱如果之前曾有些天一直保存在酸性环境中，会对柱子有什么损坏吗？ph在2左右。

pH2左右容易使键合在硅胶基质上的固定相水解流失，包括C18和封尾试剂的水解，封尾试剂相对更容易水解。不知道你保存的酸性环境是不是含有缓冲盐，如果不含缓冲盐，只是短期几天保存在酸性流动相中，也不必过份担心，最多相当于这几天一直在使用这根色谱柱，因此减少几天的使用寿命吧；有缓冲盐就麻烦一点，保存期间水分挥发可能会导致缓冲盐结晶在柱内析出，对柱子损伤很大。

没有缓冲盐的，那就好，但是对于峰形的问题还是很发愁，昨天还出了一个问题，同一个样品，在一台仪器上出来时分叉的峰，在另一台是一个峰，并且纯度还蛮高的，出封时间在8-10min，不知道咋办了，所用的条件应该是一样的

两台仪器用的是一根柱子不？如果不是一根柱子就说明是柱子的问题

根据wkfei1128所说的这个现象，我认为有可能是仪器的问题，也有可能是柱子的问题；要查明到底是仪器还是柱子上的因素引起的其实很简单，只要把需要做样的这根色谱柱分别接到两台不同的仪器上分析这个样品即可，需要注意的是，查原因的时候不能接保护柱，特别是填料与色谱柱不匹配的保护柱，因为保护柱上的污染物有时会引起峰形分叉，用填料与色谱柱不匹配的保护柱也有可能造成这种分叉峰。所以，我们需要更确切一些的证据才能确认到底是什么原因引起的，在这之前什么结论都不应该下，因为在查明之前所有的因素都应该算作可能的原因。