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主题：【求助】用UPLC-MS/MS分离六种多环芳烃，如何将其中的同分异构体完全分开

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laina0319
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发表于：2010/10/07 20:53:53 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
悬赏金额：10积分 状态： 已解决
我在用UPLC-MS/MS分离六种多环芳烃，其中有两组同分异构体共五种物质，但是该五种物质只出了四个峰。我用的色谱柱是RP-18 50mm,甲醇—水为流动相，梯度洗脱。请各位前辈指点，如何能将所有物质完全分开？非常谢谢！
推荐答案：anyizhimin回复于2010/10/08
最直接的方法是换一根柱效更高的色谱柱。
如果不换，可以考虑：1.将纯水换为缓冲液，以获得更强的保留。2.样品一定有两个目标物出峰重叠了，将这个出峰位置之前的一段梯度变化减缓。
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2010/10/7 21:27:23 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
电离源用的是什么？ESI、APCI、APPI？
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netsking
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2010/10/8 4:55:00 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 yzyxq(yzyxq) 发表:
电离源用的是什么？ESI、APCI、APPI？

楼主问的是如何在LC 上分离开, 不是Ion分离.
可以试一试改变剃度或试一试不同型号的柱子.
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frappuccino
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2010/10/8 8:29:16 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
试试BEHC18 或者 HSS C18
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junjun203
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2010/10/8 12:36:52 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如果一般的柱子分不开的话可以换手性柱试试
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anyizhimin
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2010/10/8 12:58:03 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
最直接的方法是换一根柱效更高的色谱柱。
如果不换，可以考虑：1.将纯水换为缓冲液，以获得更强的保留。2.样品一定有两个目标物出峰重叠了，将这个出峰位置之前的一段梯度变化减缓。
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frappuccino
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2010/10/8 14:56:05 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
换一根柱效更高的色谱柱吧
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laina0319
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2010/10/8 20:48:30 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 yzyxq(yzyxq) 发表:
电离源用的是什么？ESI、APCI、APPI？


电离源我用的是APCI，请教过别人说APPI更好，但是我们这只有ESI和APCI
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laina0319
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2010/10/8 20:57:38 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 anyizhimin(anyizhimin) 发表:
最直接的方法是换一根柱效更高的色谱柱。
如果不换，可以考虑：1.将纯水换为缓冲液，以获得更强的保留。2.样品一定有两个目标物出峰重叠了，将这个出峰位置之前的一段梯度变化减缓。


我之前用过苯基柱效果不好，C18也不好，但是没试过缓冲液，这个对柱子的平衡是不是要求更高，请指教。
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anyizhimin
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2010/10/8 21:28:02 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
C18平衡个20倍柱体积就足够了，可以通过调节调节缓冲液的种类、离子强度、pH来调节目标物的保留时间来改善分离。
另，换一根柱效更高的色谱柱不是换色谱柱的种类而是换一根分离能力更强的色谱柱，比如换一根填料颗粒更小的C18柱。
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laina0319
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2010/10/10 19:49:11 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 anyizhimin(anyizhimin) 发表:
C18平衡个20倍柱体积就足够了，可以通过调节调节缓冲液的种类、离子强度、pH来调节目标物的保留时间来改善分离。
另，换一根柱效更高的色谱柱不是换色谱柱的种类而是换一根分离能力更强的色谱柱，比如换一根填料颗粒更小的C18柱。


谢谢您的指教，换柱子费用太高，所以不考虑换柱子。
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