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液相色谱（LC）

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主题：【求助】关于目标峰的确认

浏览0 回复6 电梯直达

wanshu001

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发表于：2010/11/14 21:55:14 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

今天做个样品，对照品的出峰时间是11.265min，然后样品只有在11.785min的时候才有峰，在11.265min附近没有峰，这样我能否认为11.785min时候出的峰是目标峰呢？我是感觉相差太大了。。。一般出峰时间与对照品相比正负值在什么范围才能准确去断定？

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2010/11/14 22:06:17 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

可以做个样品加标，即取一半标准一半样品，看保留时间如何，就能确定

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有水有渝

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2010/11/14 22:10:17 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 老多_小多(emoc98311) 发表:
可以做个样品加标，即取一半标准一半样品，看保留时间如何，就能确定

浓度不要太大以防如果是两个物质的话，因分离度不够而导致错误的结论。

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tyrone

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2010/11/15 11:36:38 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 wanshu001(wanshu001) 发表:
今天做个样品，对照品的出峰时间是11.265min，然后样品只有在11.785min的时候才有峰，在11.265min附近没有峰，这样我能否认为11.785min时候出的峰是目标峰呢？我是感觉相差太大了。。。一般出峰时间与对照品相比正负值在什么范围才能准确去断定？

严格来说，液相色谱用保留时间定性的话，要改变3次流动相保留时间都重复才能定性，但一般情况下我们都采用一种流动相来判定，但是你上面说的这个保留时间差的太多了，一般液相色谱对保留时间的重复性是有要求的，7次或其它奇数次连续进样保留时间的RSD值要小于1才符合液相色谱的要求，我们在实验时，一般对照和样品保留时间的差别不会超过0.1分钟。

也就是说，如果你多次实验，且重复性较好的情况下，这两个峰的出峰时间相差较多，不能认定是同一物质。

不过建议你首先看一下温度，泵的流速等问题，然后再做一下重复性实验。

对了别忘了考虑一下柱子环境问题，有些条件下柱子本身会不稳定。

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