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土壤固体废弃物监测

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主题：【求助】求土壤多酚氧化酶测定方法，我已有，但是看不懂，求高手解释

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heben818

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发表于：2010/12/08 08:51:48 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

试剂配制
(1)1%邻苯三酚溶液
(2)乙醚。
(3)0．5N盐酸。
(4)重铬酸钾标准溶液——o．75g重铬酸钾溶于1升0.5N
HCl(相当于50mI醚中含5mg紫色没食子素)。
(5)pH4．5柠檬酸——磷酸缓冲液。
标收曲线绘制：取重铬酸钾标准溶液，用o．5N HCI稀释成
各种不同浓度。定容后，在分光光度计上于430nm处比色测定。
以光密度位为纵坐标，以浓度为横坐标绘制标准曲线。
2。投作步骤取1g土样(过o．25mm筛)，置于50ml三角
瓶中，然后注入10ml 1％邻苯三酚溶液，将瓶内含物摇荡后放
在30度恒温掐小培养2h。取出后加4mlpH 4．5柠檬酸——磷酸
缓冲液，再加35ml乙醚，用力摇荡数次，萃取30min。最后，
将含溶解的紫色没食子素的着色乙醚相进行比色。比色时用波长
为430nm的滤光片。为防止因乙醚引起的误差，每比色一次用
元水乙醇洗涤比色液槽一次。
为了消除土壤中原有的醚溶性有机物质而引起的误差及校正
没食于酚的纯度，需设无基质的土壤和无土壤的基质作对照。在
无基质的土壤的对照中，用水代替基质进行培养。
3．活性表示紫色没食子索的量，根据用重铬酸钾绘制的标准曲线查知。
多酚氧化的活性，以2h后1g土壤中紫色没食子素的毫克
数表示。

方法如上所述

请问：

1，重铬酸钾的标准曲线如何绘制，分别取那些浓度？
2，怎样用乙醚萃取？
3，最后的计算公式是什么？

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2010/12/8 13:06:47 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

1、重铬酸钾曲线浓度的配制要根据样品的含量怎么样。
2、乙醚的萃取方法说得很明白，按照做就行。
3、这份资料应该有公式的吧。

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rewarden

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2010/12/9 15:05:09 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

1、标准曲线如果不知道做多大的话就尽量多做几个，梯度放大点，最大值最好大点，然后做个预实验，看看大概范围，最后敲定。
2、乙醚萃取貌似很清楚啊，就是混合一起摇就行，最后把乙醚吸出来。
3、公式就是你通过标准曲线查出浓度，然后浓度*30/1单位应该是你重铬酸钾标准浓度的单位。

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2010/12/9 20:55:15 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 rewarden(rewarden) 发表:
1、标准曲线如果不知道做多大的话就尽量多做几个，梯度放大点，最大值最好大点，然后做个预实验，看看大概范围，最后敲定。
2、乙醚萃取貌似很清楚啊，就是混合一起摇就行，最后把乙醚吸出来。
3、公式就是你通过标准曲线查出浓度，然后浓度*30/1单位应该是你重铬酸钾标准浓度的单位。

回答的很到位

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